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發(fā)布時間:2024-11-28
染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話,同一張涂片上的細胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項染色。急性粒-單核細胞白血病 該染色法在急性粒-單核細胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細胞,甚至少數(shù)病例在單個細胞內(nèi)同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細胞白血病的診斷上具有獨特價值,江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話。糖類從組織化學技術(shù)角度來分,江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認為是由于固定劑把細胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能核蛋白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話將動物殺死后迅速取出所需要的組織。

特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:1、特異性高、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì)。剛果紅染色作為經(jīng)典的方法,比天狼星紅、甲基紫等其他方法都要實用。淀粉樣物質(zhì)(剛果紅及天狼星紅染色)。2、染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時,同時陽性著染對比度也很明顯。
染色的一般原則:因檢測細胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細胞做單陽對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。標記抗體常用熒光素 FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發(fā)光488nm 發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號較強;檢測某些弱表達的抗原,使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm, 發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關(guān)試劑盒。組織石蠟切片的染色檢測。

糖原染色 用于鑒別淋巴系統(tǒng)細胞增生的性質(zhì)鑒別紅細胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細胞白血病時PAS積分升高巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達100--200以上用于不典型巨核細胞與李-斯細胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強陽性后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強陽性而后者反應(yīng)為陰性或弱性。生物膜與細胞器的研究。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話
常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進行特殊染色。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話
糖原染色試劑:本試劑盒適用于骨髓細胞涂片,血液細胞涂片,以及組織石蠟切片的染色檢測。操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff Stain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑,能夠氧化組織或者細胞中的糖原及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使其轉(zhuǎn)變?yōu)槎┗H┰倥c雪夫液中的無色品紅結(jié)合產(chǎn)生一種紫紅色的化合物,定位于胞漿上。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒服務(wù)電話
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