糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖,正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5,正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話.傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化,正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話。應(yīng)該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話

糖原染色臨床意義:1、急性淋巴細胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細胞呈強陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng);缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng);急性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病、良性淋巴細胞增多癥、尼曼-皮克細胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細胞為陰性反應(yīng)。偶有個別幼紅細胞呈陽性反應(yīng)。2、幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞,巨核細胞呈強陽性反應(yīng);霍奇金細胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。3、幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細胞,腺細胞呈陽性反應(yīng)。正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。

糖原D-PAS染色液:使用方法:1、兩張相同切片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水。2、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理,入水中1h作為對照。3、流水沖洗兩張切片各5~10min。4、入過碘酸溶液,室溫放置5~8min,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入Schiff Reagent,置于室溫陰暗處浸染10~20min。7、自來水沖洗10min。8、入Mayer蘇木素染色液,染細胞核1~2min。9、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s。10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗使其返藍。11、二甲苯透明,中性樹膠封固。
糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng)) 原理 多糖中乙二醇基 經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合, 形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。 無紅色顆粒為陰性 _x000c_臨床意義 1、正常血細胞的染色反應(yīng) 粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含 量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。 淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆粒或團塊。 正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別: 急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應(yīng),以彌 散性為主; 急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應(yīng)。如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病。

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕叮舫蓤F或沒有氣味,則不能用,配制時使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時氧化時間適當(dāng)縮短;如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時可適當(dāng)縮短反應(yīng)時間。可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。上海正規(guī)糖原染色試劑盒
多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話
醫(yī)院檢驗中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1 蒸餾水煮沸除去 C02,逐漸加堿性 品紅 2.08 溶解后,待冷卻至 60℃,加 1mm01 兒 HCl40ml, 再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳 1.5g, 放置半天后過濾。配好后液體為無色透明,保存于 4℃ 冰箱中。 2.過碘酸作用液:過碘酸 1g 溶于蒸餾水 100ml 中,或取 過碘酸鉀(1tI04)0。698 加蒸餾水 100ml,微加熱使溶 解,再加濃硝酸 0.3m1,置冰箱中保存。 3.固定液:95%乙醇 90ml 與甲醛 10m1 混勻。 4.20g/l 甲基綠:甲基綠 2g 溶于 100m1 蒸餾水。 [操作] _x000c_(1) 新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內(nèi) 10 分鐘。 (2) 水洗數(shù)次后,對照片先用唾液消化 30 分鐘,也可在 同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對照,另一半做 測定。 (3) 水洗后,滴加過碘酸數(shù)滴于涂片上,作用 10 分鐘后, 再水洗數(shù)次。正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話
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