外泌體(exosome)是所有細胞釋放出的細菌大小的顆粒。它們天然地存在于血液中。根據來自美國德州大學MD安德森一些疾病中心的一項新的研究,對外泌體進行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學系研究員RaghuKalluri博士。在這項新的研究中,經過基因修飾的外泌體(被稱作iExosome)能夠運送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,從而導致胰腺病模式小鼠病情緩解,增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾(RNAi)的靶向方法:利用這些天然的納米顆粒(即外泌體)運送小干擾RNA(siRNA)或短發夾RNA(shRNA)分子來靶向胰腺病細胞中的KRAS突變基因,從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負荷和存活。他們證實外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發揮作用,開封外泌體提取試劑廠家,開封外泌體提取試劑廠家,開封外泌體提取試劑廠家,這是因為這些納米大小的囊泡(即外泌體)輕松地在體內遷移和進入靶細胞(包括病細胞)中。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不高的問題。開封外泌體提取試劑廠家

外泌體的組成:外泌體主要含有融合蛋白和轉運蛋白、熱休克蛋白(HSP70)、CD類蛋白以及磷脂酶和其他脂質相關蛋白,但是不同來源的外泌體的組成有差異。外泌體的提取方式:1、離心法:此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足。2、過濾離心:這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣純度不足。3、密度梯度離心法:用此種方法分離到的外泌體純度較高,但是前期準備工作繁雜。4、免疫磁珠法:這種方法可以外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單,但生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性。5、色譜法:此種方法分離出的外泌體大小均一,但設備特殊,應用不普遍。合肥外泌體提取試劑廠家供應超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。

外泌體作為RNAi藥物載體的療效:這項研究,檢測了利用exosomes作為RNAi靶向藥物的效果,并證明了這個過程中exosomes進行免疫逃逸的機制:對exosomes進行基因修飾(命名為iExosome),裝載上靶向胰腺病細胞KRAS突變基因的RNA干擾藥物,在小鼠模型上進行試驗,結果表明,iExosome比同樣經過修飾的脂質iLiposome遞送效果更好,能夠壓制侵襲性胰腺病生長;這得益于exosomes表面的CD47,它能夠阻止exosomes在血液循環系統中被單核細胞清理。這項研究結果對致力于exosomes轉化醫學的科學家來說,可謂振奮人心!
外泌體的生物學功能:1、初次報道的外泌體生物功能是紅血球成熟過程中排出來的蛋白質。2、進一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白質和RNA等物質。3、可促進生物體免疫應答反應。4、對凝血和血管生成其促進作用。5、可通過化學信號參與病細胞的轉移。6、在哺乳期的免疫調節過程中起到重要的作用。7、不參與觸發下游信號傳導,而且特異性靶向受體細胞和交換蛋白。8、可提供特殊的核酸且起到運輸功能。9、作為細胞-細胞之間傳遞信息的重要分子。10、在細菌和朊蛋白等多種病原體之間起著獨特的作用。外泌體鑒定方式:主要有四種方法:透射電子顯微鏡(TEM)、Nanosight、WesternBlot和流式細胞術。通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片,制成體液樣本備用。

有的外泌體分離方法需要高速離心,需要使用大型機器,耗費近24小時的時間才能獲得,非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質量。這項研究有望解決這一難題。在論文中,研究人員們提供了一種通過微流體和聲學的獨特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開發的原始聲學分選裝置由兩個傾斜的聲學換能器和一個微流體通道組成,當這些傳感器產生的聲波相互碰撞時,形成產生一系列壓力節點的駐波。每當細胞或顆粒流過通道并遇到一個節點時,壓力會將細胞引導離開中心一點點。細胞移動的距離取決于大小和其他屬性(如可壓縮性),這樣,當到達通道末尾時,不同大小和性質的細胞就能夠被分離開來。這種方法分離得到的外泌體,基本上不改變其生物或物理特征,為開發評估人類健康以及疾病診斷和進展提供了有吸引力的新方法。利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。合肥外泌體提取試劑單價
由于外泌體的特殊結構和功能,使得它具有潛在的應用價值。開封外泌體提取試劑廠家
外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯系緊密,研究思路可以分為三大類:表達譜、分子標志物和分子機制方向,其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數據為主要內容,短平快發表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證,建立ROC、KM曲線,分析分子與臨床疾病的相關性為主,通常文章影響因子在3-10分之間。分子機制研究,顧名思義要做到細胞功能、機制研究深度,因此工作量通常較大,影響因子通常能夠上10+。開封外泌體提取試劑廠家