培養基防止污染應該注意以下事項：確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀，可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀，確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證，后者應在每次除菌前，寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外，應將有毒區與無毒區嚴格分開，并有各自自立的空氣凈化系統及孵室，有毒區對無毒區應保持相對負壓，防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。半固體培養基，指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀
培養基滅菌方法有哪五種類型：1、輻射滅菌原理方法：輻射滅菌原理：是用高能電磁輻射和細菌核酸的光化學反應引起細菌死亡。常用的是紫外線，X射線和伽馬射線。主要用于室內空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法：干熱滅菌原理：是采用高溫氧化微生物，使蛋白質變性并濃縮電解質以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法，化藥滅菌原理：使用化藥與微生物細胞中的成分發生反應，從而使蛋白質變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法：過濾滅菌原理：是使用不能滲透的微生物濾膜進行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細孔濾膜對壓縮空氣，酶溶液和其他對熱不穩定的復合溶液進行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法：在工業生產中，用于滅菌對于培養基，管道和設備，通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間，這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理：是直接用蒸汽進行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱。蒸汽具有強大的穿透力，破壞細菌蛋白質和核酸的化學鍵，使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀異養微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應在培養基中至少添加一種有機物。
培養基的安全分裝：無菌補料：通過分裝口可以定量添加無菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過使用一個瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過一個septum膜，使用注射器將添加劑加入，確保了添加劑的無菌添加。無菌分裝：培養基制備器的分裝口可以在分裝的時候打開，用于無菌分裝培養基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養基的無菌分裝，硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養基可以通過集成的空壓機產生的無菌空氣壓力分裝或通過連接到常見的蠕動泵或其他集成成泵的裝置，來進行培養基的分裝。分裝選項：制備和滅菌過的培養基可以通過一個軟管進行分裝。在每次滅菌進程中，內吸管和分裝口也通過進入的蒸汽進行了滅菌。分裝軟管和連接到該軟管的分裝接頭必須使用合適的蒸汽滅菌工藝預先滅菌，并且必須在無菌條件下連接到分裝口。
培養基的稱量和溶解：小心稱量所需量的脫水合成培養基（必要時佩戴口罩或在通風柜中操作，以防吸入含有有毒物質的培養基粉末），先加入適量的水，充分混合（注意避免培養基結塊），然后加水至所需的量后適當加熱，并重復或連續攪拌使其快速分散，必要時應完全溶解。含瓊脂的培養基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意：培養基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用，應重新制備。基礎培養基各種微生物的營養要求雖不相同，但多數微生物需要的基本營養物質相同。
微生物培養基：根據微生物類型和培養基的組成，微生物培養基通常可以分為：限定培養基、復雜培養基、選擇性培養基和富集培養基。在確定的培養基中，確切的化學成分是已知的。這些類型的培養基通常由純生化物質組成，通常用于研究微生物的較低營養需求。相比之下，復雜介質的確切化學成分尚不清楚。復雜介質培養基類型通常包含生物來源的試劑，例如酵母提取物和蛋白胨，其中確切的化學成分未知。復雜培養基通常提供多種生長因子，有助于未知和挑剔的細菌物種的培養。脫水培養基，又稱預制干燥培養基，指含有除水分外的一切成分的商品培養基。寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀
培養基配成后一般需測試并調節pH，還須進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀
培養基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后，均要對分配器的管道系統進行沖洗，在分裝無菌培養基前，則要采用無菌硅膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3一4h，如用塑料平皿須在35℃培養箱中倒置30一60min。讓水蒸汽自然蒸發。斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基，如沾有培養基應用布抹去，以避免污染。寧夏瓊脂培養基 培養基制備儀
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