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來源: 發(fā)布時間:2023-08-27

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因為RIP做完得到的是RNA序列,要做后續(xù)檢測,比如測序、判斷目標(biāo)序列位置等,是不是都必須要做RT-PCR,得到逆轉(zhuǎn)錄的DNA后,后面就跟ChIP相同了?細(xì)胞實驗外包。常見的用realtimeqRT-PCR。如果對照的目的是保證兩個樣品間加入的細(xì)胞量一致或者進(jìn)行定量,理論上說,使用input作為判別,計算不同樣品上樣量的差異。如果對照的目的是為了看IgG以及目的抗體富集的非特異性mRNA的量的話,那么可以找一個確定不會與目的抗體結(jié)合的RN**段設(shè)計primer進(jìn)行qPCR,用來看IgG以及目的抗體拉下來的背景情況。RIP可以看成是普遍使用的染色質(zhì)免疫沉淀ChIP技術(shù)的類似應(yīng)用,但由于研究對象是RNA-蛋白復(fù)合物而不是DNA-蛋白復(fù)合物,RIP實驗的優(yōu)化條件與ChIP實驗不太相同(如復(fù)合物不需要固定,RIP反應(yīng)體系中的試劑和抗體相對不能含有RNA酶,抗體需經(jīng)RIP實驗驗證等等)細(xì)胞實驗外包跟其他外包實驗區(qū)別在哪里?

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