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新疆組織免疫組化推薦

來源: 發布時間:2024-06-01

免疫組化指的是根據抗體與抗原特異結合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,簡稱ICC)。這兩個詞大家經常混著用,看著好像差不多,但實際上還是有點區別。IHCvsICC對于IHC,組織是來自患者或動物,經過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細胞組分的定位,同時維持周圍組織的原先結構。對于ICC,大部分細胞外基質及其他基質組分被去除,只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液,來自患者或動物(如血涂片、拭子等),或在實驗室中進行的組織培養細胞系。 關于免疫組化的常見問題匯總。新疆組織免疫組化推薦

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免疫組化的結果分析:

免疫組化實驗通常需要設置陽性對照、陰性對照(或替代對照)(陽性對照是排除方法和實驗系統有無問題;陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色)。一般情況下,陽性對照顏色的特點為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質具有結構性。且染色的強度不同(顏色深淺不一);陰性對照的特點為:染色細胞與組織無區別,顏色具有彌散性,分布均勻。

英瀚斯生物可承接各類病理染色,包括免疫組化。

說明:免疫組化實驗可以對結果進行定量分析,但要實驗得到的必須是高質量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結果才會比較準確。 新疆組織免疫組化推薦免疫組化的樣本保存要求是什么?

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細胞爬片免疫組化檢測實驗步驟

1、選擇貼壁良好的細胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。

2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%過氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內源性過氧化物酶。

4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。

5、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過夜。

6、PBS洗3次,每次5min。


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7、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗,4℃孵育50min。

8、PBS洗3次,每次5min。

9、去除PBS液,每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,顯微鏡控制顯色。

10、顯色完全后,蒸餾水或自來水沖洗,蘇木素復染,1%鹽酸酒精分化(1s),自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。

11、切片經過梯度酒精(70-100%)10min一個梯度,脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封固。

免疫組化技術應用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹。對于反應性增生還是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細胞增生的單克隆或多克隆性來區別。在濾泡反應性增生時,濾泡反應中心的細胞不表達細胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性濾泡細胞有bcl-2的高表達,bcl-2陽性。而增殖細胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通過對cancer細胞增生的程度作出評價,從而提示增生細胞的良惡性。做好免疫組化,你需要了解這些!

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什么是免疫組化?免疫組化的原理是什么?

1、定義:用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學(immunohistochemistry)技術或免疫細胞化學(immunocytochemistry)技術。

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2、原理:根據抗原抗體反應和化學顯色原理,組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應,前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結合,通過呈色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分,在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。 如何做好免疫組化實驗?山西做得好的免疫組化注意事項

常見的免疫組化方法有哪些?新疆組織免疫組化推薦

免疫組化(IHC)利用抗體檢測組織切片中蛋白質和其他抗原的定位。

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抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測或熒光染料熒光檢測進行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質印跡或ELISA,但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達譜對病理學家以及作為診斷工具都具有重要意義。

IHC實驗成功的關鍵在于穩定、優化且可重復的染色方案,而該方案應使用高質量的特異性試劑。 新疆組織免疫組化推薦

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