免疫組化的特點：

1）特異性強。免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時，才會出現交叉反應。

2）敏感性高。在應用免疫組化的起始階段，由于技術上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術，那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；現在由于ABC法或SP三步法的出現，使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合，這樣高敏感性的抗體抗原反應，使免疫組化方法越來越方便地應用于常規病理診斷工作。

3）定位準確、形態與功能相結合。該技術通過抗原抗體反應及呈色反應，可在組織和細胞中進行抗原的準確定位，因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態與功能相結合的研究，對病理學領域開展深入研究是十分有意義的。

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免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些？

1、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果，抗原抗體反應有前帶和后帶效應，必須摸索比較好濃度。

2、抗原修復不全，對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位，以利于與抗體結合；建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗，這是比較好的時間和次數。若不行，還可高壓修復。

3、組織切片本身這種抗原含量低。

4、血清封閉時間過長。

5、DAB孵育時間過短。

6、細胞通透不全，抗體未能充分進入胞內參與反應。

7、開始做免疫組化，建議一定要首先做個陽性對照片，排除抗體等問題。 湖北細胞免疫組化怎么選擇免疫組化實驗原理，操作步驟盡在英瀚斯實驗外包。

免疫組化的抗原修復技術

抗原修復是免疫組化實驗中的重要步驟，目的是暴露被固定過程掩蓋的抗原表位。常用的抗原修復方法有熱修復和酶消化。免疫組化熱修復是通過加熱（如微波或高壓）使蛋白質變性，暴露抗原表位。常用的緩沖液有檸檬酸鹽緩沖液和EDTA緩沖液。酶消化是通過蛋白酶（如胰蛋白酶）消化部分蛋白質，暴露抗原表位。免疫組化實驗中不同的抗原修復方法適用于不同的抗原和抗體，需要根據免疫組化具體實驗條件進行優化調整。

免疫組化結果中的假陰性是指所有抗體標記的切片均呈陰性，無陽性信號，假陰性結果不是真實的反應。導致假陰性結果的原因有:(1)抗原修復方法選擇不當，根據不同的抗原特點采用不同的修復方法，大多數抗體要求熱修復，熱修復又包括高壓修復、微波修復及煮沸熱修復;而對某些細胞內抗原和細胞間質抗原需要用酶消化，如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化，而Vimentin則不用修復;(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結果的假陰性會導致錯診或漏診，進而影響臨床診斷及延誤醫療。解決這一問題的可通過設立陽性對照，比較兩者染色結果。若陽性對照有表達，表明試劑和染色體系及實驗步驟均無問題;若陽性對照無表達，則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題，應逐一查找原因。英瀚斯生物，組織包埋、切片、染色、免疫組化拍照、報告分析，一站式搞定！

免疫組化的抗體選擇

抗體是免疫組化實驗成功的關鍵因素之一。選擇合適的一抗需要考慮其特異性、靈敏度和適用性。特異性是指抗體只與目標蛋白結合，而不與其他蛋白發生交叉反應。靈敏度是指抗體能夠檢測低豐度的目標蛋白。適用性是指抗體適用于免疫組化實驗，而不是其他實驗（如Western blot）。此外，免疫組化實驗中還需要考慮抗體的宿主物種、克隆性和濃度。免疫組化二抗的選擇則需要考慮其與一抗的匹配性，以及是否帶有顯色或熒光標記。 免疫組化結果分析是什么？云南免疫組化價格

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免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標記物必須具有的，但至今所發現的cancer標記物還沒有能完全滿足這些標準。某些正常細胞也分泌一些cancer標記物，因此cancer細胞學并不是單獨產生一種標記物，即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面。在免疫組化操作中都必須有適當的陽性與陰性對照，作為技術完整性質量控制，如對照組被忽略或不理想時，免疫組化染色的結果要謹慎對待，免疫組化的正確結果不僅要依靠技術步驟上規范化操作，而且有賴于正確的解釋，在報告免疫組化染色結果時不應孤立地解釋，應考慮到診斷與鑒別診斷、所應用的抗體特性、所研究組織性質，同時還要注意假陽性與假陰性結果的干擾。河南切片免疫組化價格