HE 染色是病理的主要常規染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現在細胞質與間質,染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色的實驗目的以及實驗結果分析。湖南質量好的HE染色多少錢

HE染色觀察細胞凋亡,凋亡檢測中形態學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后,在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細胞的形態或染色的類型來判斷凋亡的發生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備:對于貼壁細胞,可將蓋玻片放于培養器皿中,讓培養細胞長于玻片上,然后用藥物誘導細胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞,用藥物誘導細胞凋亡后,離心1000r/min收集細胞,用PBS洗2次,收集調整細胞數為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學顯微鏡下,貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍色或藍黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細胞,整個細胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質顏色加深等。湖南質量好的HE染色多少錢冰凍切片是否可以做HE染色?

HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法,是**基本的病理學染色技術。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態結構特點均可顯示出來。質量好的HE具備條件1.細胞核與細胞漿藍紅相映,鮮艷亮麗;2.胞核鮮明、核膜、核染色質顆粒均清晰可見;3.組織或一般結構特點及假物質成分均能顯示出來。
HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標志性結構——肝小葉。顯微鏡首先調4倍物鏡,調準焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結構。人的肝小葉之間結締組織少,小葉分隔不明顯,但動物如豬或小鼠,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結構。肝細胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細胞。20倍物鏡下,肝細胞內染色為藍色的是細胞核,細胞核大而圓,居中,異染色質少而著色淺,能清晰看到核仁。肝細胞胞質豐富,多成嗜酸性,當蛋白質合成旺盛時,胞質內出現散在的嗜堿性物質。肝細胞內有豐富的細胞器比如溶酶體、高爾基體、內質網,等等,但是在光鏡下是無法看到的,需要在電鏡下才能觀察到。當然,肝小葉內除了肝細胞,還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細胞等組織形態,但是在HE染色時并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細胞形態是否完整、胞核有無增大、肝小葉形態是否完整,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用。科研常備實驗操作之HE染色。

HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,固定過久,導致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,而透明、脫水、浸蠟均是如此,這樣在后期染色時就會出現染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,切片厚薄不一,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,導致脫蠟不徹底。(4)染色液過少,著色不均勻;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,這樣會導致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。骨組織HE染色的操作流程。陜西HE染色檢測
HE染色觀察細胞形態變化。湖南質量好的HE染色多少錢
HE染色細胞漿染色原理:細胞漿內主要成分是蛋白質,為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系,當pH調到蛋白質等電點4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當pH調到6.7-6.8時,大于蛋白質的等電點pH值,表現酸性電離,而帶負電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現時胞核也被染色,核和胞漿難以區分。因此必須把pH調至胞漿等電點以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質的氨基正電荷(陽離子)結合而使細胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明的對比。湖南質量好的HE染色多少錢