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新疆靠譜免疫組化注意事項

來源: 發(fā)布時間:2021-11-08

免疫組化技術有哪些應用?

定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢。相比于其他蛋白檢測方法,免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高,是定位檢測分析優(yōu)先方法,尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉移性惡性**的原發(fā)部位;對某類**進行進一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學技術的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時,準確率可達50%-75%。


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在臨床應用中,免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學基礎對cancer進行分類很困難。如胃腸道梭形細胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質起源的胃腸道間質瘤(GIST),還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細胞cancer,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預后明顯的不同,但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細胞cancer,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。新疆靠譜免疫組化注意事項免疫組化的那些小知識,都在這里!

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免疫組化結果中的假陰性是指所有抗體標記的切片均呈陰性,無陽性信號,假陰性結果不是真實的反應。導致假陰性結果的原因有:(1)抗原修復方法選擇不當,根據(jù)不同的抗原特點采用不同的修復方法,大多數(shù)抗體要求熱修復,熱修復又包括高壓修復、微波修復及煮沸熱修復;而對某些細胞內抗原和細胞間質抗原需要用酶消化,如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化,而Vimentin則不用修復;(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結果的假陰性會導致錯診或漏診,進而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療。解決這一問題的可通過設立陽性對照,比較兩者染色結果。若陽性對照有表達,表明試劑和染色體系及實驗步驟均無問題;若陽性對照無表達,則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題,應逐一查找原因。

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色? 

(1)縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。

(2)一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。

(3)內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色; 

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(4)非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果; 

(5)縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等; 

(6)適當增加PBS沖洗次數(shù)和浸洗時間,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要; 

(7)防止標本染色過程中出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。 免疫組化結果怎么看?

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免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學來源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通過固定過程,要么是單獨的透化步驟,這樣抗體才能與細胞內的靶點相結合。而IHC可能不要單獨的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理,才能進行抗體染色。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當然,就染色而言,根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的。免疫組化實驗原理,操作步驟盡在英瀚斯實驗外包。甘肅做得好的免疫組化

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免疫組化分類中免疫酶標方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前定位準確、對比度好、染色標本可長期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當屬***法(過氧化物酶-抗過氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過氧化物酶復合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。新疆靠譜免疫組化注意事項

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