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江蘇大鼠原代細胞構(gòu)建

來源: 發(fā)布時間:2025-09-02

使得初學者或不熟練的實驗人員在用爬片法制備原代細胞時,會造成污染或?qū)嶒炂鞑?實驗動物)的浪費,損失人力,物力,財力。這就急需一個出色的一體式原代細胞爬片培養(yǎng)瓶來滿足上述實驗需求。申請人根據(jù)多年的提取原代背根神經(jīng)節(jié)膠質(zhì)細胞和血管平滑肌細胞的經(jīng)驗,創(chuàng)造性、開拓性的設計了一種一體式原代細胞爬片培養(yǎng)瓶。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的為了解決現(xiàn)有培養(yǎng)瓶(皿)進行原代細胞爬片培養(yǎng)存在的許多不便和不足之處,故提出一種操作方便,結(jié)構(gòu)設計合理,有助于爬片法制備原代細胞的培養(yǎng)瓶。為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術方案:一種一體式原代細胞爬片培養(yǎng)瓶,包括瓶身,所述瓶身的其中一側(cè)端部設有爬片瓶頸和加樣口,瓶身的上端部設有外接圓柱,所述外接圓柱的頂端封閉、下端與瓶身連通,并且外接圓柱內(nèi)設有活動圓盤和纖維圓盤,所述活動圓盤位于纖維圓盤的上方,活動圓盤的四周外壁與外接圓柱的內(nèi)壁可滑動接觸,并且在外接圓柱內(nèi)壁上設有用于限制活動圓盤向上活動的阻隔環(huán),同時在外接圓柱位于活動圓盤上方的柱體上設有正壓口,所述纖維圓盤固定設置,并且在纖維圓盤內(nèi)可活動穿插有連接桿,所述連接桿上端與活動圓盤固定連接。HUVSMC(人臍靜脈血管平滑肌細胞)。江蘇大鼠原代細胞構(gòu)建

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本發(fā)明涉及細胞分離培養(yǎng)技術領域,具體是涉及一體式原代細胞爬片培養(yǎng)瓶。背景技術:原代細胞是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。原代細胞培養(yǎng)一般指的是第1代到第10代以內(nèi)的細胞培養(yǎng)。原代細胞用途,不僅應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)等。原代細胞相較于細胞株(系)而言,有著不可替代的重要性。現(xiàn)有的原代細胞提取方法主要有消化分離法和組織塊貼壁法等。現(xiàn)行的組織塊貼壁法缺乏一個整體性和封閉性更出色的培養(yǎng)瓶。傳統(tǒng)的培養(yǎng)瓶(皿)進行原代細胞爬片培養(yǎng)有許多不便和不足之處。其一是為了保證組織塊的與培養(yǎng)瓶(皿)底部的充分接觸以及良好制動,需要使用細胞爬片,而細胞爬片需要購買無菌包裝或自行高壓滅菌,由于爬片和培養(yǎng)瓶一體性不好,有造成污染的可能性,再者爬片在用鑷子拾取的過程不易,容易碎裂等。其二是在放置爬片的過程中,難以控制爬片與培養(yǎng)瓶(皿)的接觸程度,即接觸面太小,培養(yǎng)基會滲進爬片與培養(yǎng)瓶(皿)之間,在浮力的作用下,爬片會漂浮,這樣就起不到爬片的作用,若爬片與培養(yǎng)瓶(皿)的間隙很小,就會影響培養(yǎng)基的滲入,對細胞的生長增殖不利。由于上述的局限性。寧夏組織原代細胞實驗將動物某組織在合適的操作中培養(yǎng)出特定細胞,使得目的細胞得以生存、生長和繁殖,稱為原代細胞分離培養(yǎng)。

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⑦實驗完畢及時收拾,保持工作區(qū)域清潔整齊,用75%酒精清潔臺面。(3)細胞污染的預防①實驗用品防止污染。細胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌要仔細,并在無菌實驗檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。②操作過程防止污染。③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進入細胞間。④實驗開始前需要確定戴的手套沒有問題,只要接觸過生物安全柜之外的物品,必須及時對手套進行消毒。⑤進入細胞培養(yǎng)間后關好門,坐下來盡量少走動以免影響生物安全柜的風簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴格檢查所用的器材、溶液和細胞,不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無菌室內(nèi),更不能隨便使用,以免造成大規(guī)模污染。⑥細胞操作時動作要輕,必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口,并將瓶口放在火焰周圍簡單轉(zhuǎn)動燒灼,注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。⑦實驗操作時生物安全柜的隔板要盡可能放低,盡量減少談話,打噴嚏或咳嗽時不能對著工作區(qū),以免造成不必要的污染。⑧瓶蓋應當?shù)狗旁谶h離自己的地方,以避免瓶蓋被誤操作所污染。⑨不要從敞開的容器口上方經(jīng)過。

導致集中消毒設計的紫外燈無法有效照射內(nèi)部空間,容易滋生細菌,影響細胞培養(yǎng)的存活率。因此,現(xiàn)有技術存在缺陷,需要改進。技術實現(xiàn)要素:本實用新型所要解決的技術問題是:提供一種可存放大量細胞培養(yǎng)皿、空間利用率高、存放方便,具有殺菌消毒作用的新型原代細胞培養(yǎng)箱。本實用新型的技術方案如下:一種新型原代細胞培養(yǎng)箱,包括若干個用于存放細胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體,所述外箱體內(nèi)設有若干列中空的矩形槽,各所述矩形槽的兩側(cè)分別設有若干層對稱的滑槽,若干層所述滑槽由上至下等間距依次設置,每一層所述滑槽的正面及背面各存設有一內(nèi)箱盒,所述內(nèi)箱盒包括底盒、紫外燈及上蓋,所述紫外燈設于底盒內(nèi),所述底盒與上蓋的一側(cè)通過合頁鉸接,所述底盒與上蓋的另一側(cè)通過鎖扣扣合連接,所述底盒上設有推拉把手,所述底盒的兩側(cè)分別設有與滑槽適配的滑輪,所述底盒兩側(cè)的頭部分別設有與滑槽適配的滑塊。采用上述技術方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述滑槽的高度大于滑塊的高度,所述滑塊的高度大于滑輪的直徑。采用上述各個技術方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述鎖扣包括鎖環(huán)及鎖塊,所述鎖環(huán)與上蓋活動連接,所述鎖塊設于底盒外部。采用波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色鑒定,結(jié)果顯示波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色鑒定呈現(xiàn)陽性。

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經(jīng)過長時間、連續(xù)的傳代培養(yǎng)后,細胞系隨著代數(shù)的增加,細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群,除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。2、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)的翻倍,通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的,是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。3、接收到的凍存細胞該如何處理?收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快,以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。4、凍存的細胞該如何開始培養(yǎng)?(1)將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。(4)用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。(5)打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負壓,開蓋時可能會有少量溢出,這是正常現(xiàn)象)。(6)用多聚賴氨酸(或參照說明書)包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。。收到復蘇好的貼壁細胞的處理方法。黑龍江血液原代細胞服務

人臍靜脈血管平滑肌細胞分離自臍帶組織,是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)之一。江蘇大鼠原代細胞構(gòu)建

本實用新型涉及細胞培養(yǎng)裝置技術領域,具體為一種可以分離的細胞培養(yǎng)板。背景技術:細胞培養(yǎng)板,是細胞培養(yǎng)常用耗材,細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(u型和v型),不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途,培養(yǎng)細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致。此外,依孔數(shù)不同,細胞培養(yǎng)板也可分為6孔、12孔、24孔、48孔、96孔等,也可根據(jù)材質(zhì)的不同分為terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。現(xiàn)有的可以分離的細胞培養(yǎng)板在使用的過程中,存在著一些不足,比如拆卸復雜,穩(wěn)定性差,且不方便標號對比,影響實驗效率,因此需要研發(fā)一種新型的可以分離的細胞培養(yǎng)板解決尚上述問題。技術實現(xiàn)要素:本部分的目的在于概述本實用新型的實施方式的一些方面以及簡要介紹一些較佳實施方式。在本部分以及本申請的說明書摘要和實用新型名稱中可能會做些簡化或省略以避免使本部分、說明書摘要和實用新型名稱的目的模糊,而這種簡化或省略不能用于限制本實用新型的范圍。鑒于現(xiàn)有可以分離的細胞培養(yǎng)板中存在的問題,提出了本實用新型。因此,本實用新型的目的是提供一種可以分離的細胞培養(yǎng)板,能夠?qū)崿F(xiàn)在使用的過程,拆卸簡單且連接更加穩(wěn)定。江蘇大鼠原代細胞構(gòu)建

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