缺點:該移植模型的原發出現與轉移發生之間時間間隔短,不利于藥物藥效研究;且細胞為鼠源,與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細胞或組織移植入免疫缺陷型實驗動物體內。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠,例如無胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般來說,免疫缺陷程度越高,成瘤性越好。的相關研究中,人源細胞系異種移植(cell-line-derivedxenograft,CDX)模型和患者組織異種移植(patient-derivedxenograft,PDX)模型已得到廣泛應用。CDX模型方法:將5×106的人A375黑色素瘤細胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹側的雙側,成功構建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法:有研究者將93個新鮮的患者組織切成2×2×2mm3碎片的大小,皮下接種6周大的NOD/SCID雌性小鼠,建立PDX模型。優點:保留了病人的組織學和遺傳學特征,可模擬潰瘍狀態對人類黑色素瘤預后的影響。缺點:此模型移植后的潛伏期長,連續傳代后鼠基質被人類基質替代,移植率可變,免疫系統受損,有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫細胞功能的缺乏。三、轉基因小鼠模型可以通過異位表達基因,引入特定的致突變或滅活抑制基因來對小鼠進行轉基因黑色素瘤模型的構建。動物疾病模型廣泛應用于疾病機制研究、新藥靶點發現及篩選、藥效評價、轉化醫學等醫學前沿領域。西藏高脂高糖動物模型建模

低密度脂蛋白的脂質構成也與人相似。其次,為了盡可能做到模型與人類相似,還要在實踐中對方法不斷加以改進。例如結扎兔闌尾血管,固然可能使闌尾壞死穿孔并導致腹膜炎,但這與人類急性梗阻性闌尾炎合并穿孔和腹膜不一樣,如果給兔結扎闌尾基部而保留原來的血液供應,由此而引起的闌尾穿孔及腹膜炎就與人的情況相似,因而是一種比較理想的方法。如果動物型與臨床情況不相似,在動物身上有效的治療方案就不一定能用于臨床,反之也然。例如,動物內毒性性休克寧夏大鼠動物模型技術特發性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立。

實驗樣本分類實驗一般采取樣本有:血液樣本、組織樣本和細胞樣本。通常,組織樣本采集后,應立即用等滲溶液(PBS或生理鹽水)盡量把血液漂洗干凈(除非血液也是分析對象),用濾紙或紗布吸干,把樣本分切成幾分,每份的體積約2個黃豆大小,每份用一個管子裝。血液樣本的采集應根據不同實驗的要求,將會采取不同策略。血清樣本:全血中不加抗凝劑,血液凝固后取出的不含凝血因子的淡黃色透明液體。(全血標本室溫放置2小時3000rpm/min離心15min)血漿樣本:全血中加抗凝劑,血液凝固后取出的含凝血因子的淡黃色透明液體。(可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8℃,3000rpm/min離心15min)如果是做生化\ELISA等檢測可以考慮血漿和血清,根據獲得的樣本量可考慮分裝成100-500μl/管,可避免反復凍融造成的檢測誤差。生化:建議優先選擇血清,其次選擇肝素抗凝血漿;ELISA:建議優先選擇血清,其次選擇肝素或EDTA抗凝血漿;凝血實驗:只能選擇枸櫞酸鈉抗凝血漿;血常規:只能選擇EDTA抗凝全血;如果要收集其中的白細胞、血小板等建議用抗凝全血。如果要做流式建議用專門的流式用血液收集管,防止表面抗原的丟失,或者盡快安排就近檢測。樣本處理取樣完后。
導師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄,只要是和實驗相關的,無論是照片,還是文字,必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面,然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規劃首先,個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的,高效率是關鍵。建議提前一天規劃好第二天需要做的事情,按照代辦事項的格式逐條列出,哪一個時間段需要做什么事情?這樣的好處有兩點,一個是自己提前把時間預約好,可以留出足夠的時間休息和娛樂;另一個是在執行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感,辦事起來往往更高效且不會遺漏。總之,預實驗就是迷你版正式實驗,希望小伙伴們在進行預實驗的時候一定要盡可能地準備周全,這樣才能快的推進正式實驗。IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發性腎小球疾病,約占原發性腎小球疾病的 1/3。

應根據所檢測指標的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學當道的現實背景下,動物實驗除了對實驗動物的體征及生理指標進行的監控外,各種分子檢測甚至是組學檢測也開始大行其道,動物實驗結束之后的機制研究成為了實驗的重頭戲。一般來說,動物實驗檢測對象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質,因此在取樣過程中應注意防止此類物質降解,在獲取后,應及時置于溫(≤-80℃)進行保存,在后續實驗過程中,也應當注意保存條件的穩定性,避免反復凍融。常用的方法便是酶聯免疫吸附測定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方法對各類生化指標及因子進行定性及定量檢測。(2)組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細胞質及細胞核進行染色標記,以觀察細胞變化。除此之外,許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應用,如利用Masson染色檢測組織纖維化病變,Nissl染色檢測神經元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測細胞衰老等。此外,還可以通過免疫組化技術對某些特異性標記物進行免疫顯色檢測,達到原位定性或定量檢測的目的。。卵巢切除致骨質疏松大鼠模型。寧夏實驗動物模型技術
急性肺損傷(acute lung injury,ALI)。西藏高脂高糖動物模型建模
我們知道WB實驗步驟繁瑣,一次實驗歷時也不短,從提蛋白到顯影結束可能要三天,我們就講一下這里面的一些關鍵環節。一、蛋白提取及變性1、提取蛋白很多經驗豐富的WB實驗者都深有體會,蛋白提取是影響結果重要的環節之一。該過程重要的是防降解和保證蛋白濃度不要太低。防降解主要有兩點,一是裂解前注意保持樣品處于低溫環境中,二是裂解時加入足夠的蛋白酶抑制劑。我們習慣先用冰冷的PBS做心臟的體循環灌注,然后冰上取腦,分離各腦區(嗅球,皮層,海馬,中腦,小腦,延髓,丘腦,紋狀體)后置于,用液氮速凍后轉移至-80度冰箱長期保存。接著是保證蛋白濃度,即要加入適量的裂解液,加太少會使蛋白提取不充分,加太多會讓蛋白濃度太低,一般經驗是這樣的,細胞樣品例如一個六孔板的細胞加60微升的裂解液,動物組織的話每毫克組織加10微升裂解液。還要加上超聲破碎處理,具體方案見討論部分。如果沒有超聲破碎儀,那就用1毫升注射器不斷抽吸,冰上反復抽吸1分鐘左右,注意不要產生過多氣泡。(需要灌注取材的視頻可以私聊獲取,由于文件過大,又比較血腥,不宜直接放到文章里。)2、蛋白變性加入上樣緩沖液后100攝氏度煮10分鐘,這里的上樣緩沖液有兩種可選。西藏高脂高糖動物模型建模