在定量PCR時，我們常常糾結一個問題，究竟是相對定量還是***定量呢？如今，你無需糾結了，因為數字PCR（digital PCR）來了。盡管這兩種技術有些類似，都是估計起始樣品中的核酸量，但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量，而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域：拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究（如等位基因不平衡表達）、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。深圳數字PCR現貨

       目前數字PCR技術在臨床領域已經有著非常***且***地應用，例如在病原微生物檢測中的應用：HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等；在產前診斷中的應用：13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優生五項的病毒檢測等；在**靶向***相關基因檢測中的應用：肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因擴增檢測、神經膠質瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關基因檢測為例，在**形成的超早期,會出現**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高，目前只有數字PCR技術可以檢測出來。另外進行個體化***時,需要對基因組樣本進行分析,此時利用數字PCR技術也能**提高結果的可信性,進而建立合理***方案。流式數字PCR現貨能檢測低至0.01%的突變基因。

與常規PCR方法相比，數字PCR有如下優勢：

       1、能夠完全定量：常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線，但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可進行完全定量。

       2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本

       3、靈敏度高：數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個**PCR反應，這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。

       4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個**反應體系中，明顯降低了背景信號和yì zhì物對反應的干擾，擴增基質效應大大減小。

       數字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說，數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值，不受擴增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個數，能夠對起始樣本核酸分子***定量。

       數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應單元中，使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個單元都會對目標分子進行擴增，然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言，傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中，這也是數字PCR與其比較大的區別。

單張芯片一次可處理8個樣本。

       數字PCR（Digtal PCR）是一種核酸定量精密檢測的新興技術手段，于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應單元中，使每個反應單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時，加入可檢測熒光。待擴增結束時，使用統計學方法采集每個反應單元出現的熒光次數，從而定量檢測樣本中的核酸濃度。

       基于分液方式的不同，數字PCR主要分為3種：微流體數字PCR(Microfluidic digital PCR，mdPCR)、微滴數字PCR(Droplet digital PCR，ddPCR)和芯片數字PCR(Chip digital PCR，cdPCR)。

CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證。常州永諾數字PCR

油包水乳化微滴技術，在微管道中利用氣壓驅動生成十萬個微滴，單個微滴體積體積低至皮升級。深圳數字PCR現貨

定量PCR和數字PCR的特點：

       5. 目前定量PCR已經能實現高通量樣品條件下的自動化操作。   

       6. 數字PCR在單分子層面上的***定量，可以徹底擺脫對標準曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數，提高了實驗結果在批內和批間的穩定性，甚至能用來對標準品進行定標。   

       7. 基于***定量的方式，數字PCR結果的高重復性和高精度可實現微小差異的基因表達分析，如等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、microRNA表達分析等等。所謂“微小差異”的標準一般而言是指表達水平的差異在2倍以內。   

       8. 同等條件下，數字PCR在靈敏度方面擁有優勢，使得該技術已成為**的液態活檢、病原微生物檢測、轉基因成分測定、宿主殘留DNA分析等的熱門技術。

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商，致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來，持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。

浚和在不斷引進國內外先進儀器設備的同時，結合行業和市場需求，加強和客戶之間的溝通，并與國際上多家**儀器設備制造商保持著長期穩定的合作關系，不定期地與合作商進行技術交流，努力加強自身技術力量。公司配備了數名有著多年行業經驗的技術人員，依靠雄厚的技術實力、科學合理的配置方案、專業的安裝調試和周到的售后服務，得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經營產品包括：等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時，公司還提供專業的技術服務，如設備的維護、驗證等。

浚和儀器將始終以行業特點為立足點，以客戶需求為導向，不斷地提高自身專業技術能力，不停地完善客戶服務質量，在發展中保持創新的精神，力求與客戶共同進步，為行業的發展作出不懈的努力。