數字PCR是一種核酸分子***定量技術。當前核酸分子的定量有三種方法，光度法基于核酸分子的吸光度來定量；，Ct值就是指可以檢測到熒光值對應的循環(huán)數；數字PCR是***的定量技術，基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量，是一種***定量的方法。主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法，將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中，每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環(huán)之后，有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度。準確度不完全依賴于擴增效率。南京國產數字PCR價格

無創(chuàng)產前檢查

       鐮狀細胞貧血（sickle cell anemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴重的危害，可以導致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產前診斷是預防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術檢測孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結果顯示，dPCR技術能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）HBB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時，可以**的檢測出HBB基因突變[3]，可以說是相當厲害了。

南京國產數字PCR價格轉基因食品檢測（國標）。

研究方向基因表達差異研究

檢測時完全不依賴傳統的Ct值即可實現真正意義上的***定量，從而提供了比實時熒光定量PCR更精確的基因差異表達研究，尤其對于那些靶基因表達差異微小的情況：microRNA、lncRNAs等的表達分析、等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、Exosome內核酸分子定量分析等。

拷貝數變異(CNV)研究

微滴化的樣品處理及檢測，這種擺脫Ct值的計算方法而直接獲取目標基因的***拷貝數，為拷貝數變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺無法達到的，因此采用數字PCR能夠有效對NGS、aCGH的實驗結果進行驗證，并具有成本低、通量高的特點。

**個體化診療

通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術展現出了****的檢測精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現耐藥。

2.）基因表達分析

伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細胞白血病（CML）患者延長生存期，但是臨床上發(fā)現，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉錄產物表達量有很大的關系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉錄產物進行測定，結果檢測下限可以達到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢 單次微滴生成*需2分鐘。

        精細診斷是精細醫(yī)學的關鍵環(huán)節(jié)，液體活檢作為一種無創(chuàng)、均一的檢測技術，迅速成為精細診斷領域的新星，2015年被《麻省理工大學科技評論》評選為年度**突破技術， 2017年入選世界經濟論壇評出的全球**新興技術，引發(fā)了全球科研、臨床和產業(yè)界的極大熱情，已在**、產前診斷、***移植等疾病領域***被應用。

       數字PCR技術與高通量的二代測序技術，共同組成液體活檢領域的兩大利器；數字PCR技術是公認的液體活檢領域靈敏度比較高的檢測方法，采用有限稀釋的方法將目標分子分割到**的反應體系中，在不依賴標準曲線條件下實現靶標***定量檢測，能檢測低至0.01%的突變基因；Bio-Rad及Thermo Fisher目前是這一領域的主導者，分別采用微滴或芯片方式將樣本分割成兩萬份，MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。

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高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。南京國產數字PCR價格

       目前數字PCR技術在臨床領域已經有著非常***且***地應用，例如在病原微生物檢測中的應用：HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等；在產前診斷中的應用：13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優(yōu)生五項的病毒檢測等；在**靶向***相關基因檢測中的應用：肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因擴增檢測、神經膠質瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關基因檢測為例，在**形成的超早期,會出現**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環(huán)血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高，目前只有數字PCR技術可以檢測出來。另外進行個體化***時,需要對基因組樣本進行分析,此時利用數字PCR技術也能**提高結果的可信性,進而建立合理***方案。南京國產數字PCR價格

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