在定量PCR時，我們常常糾結一個問題，究竟是相對定量還是***定量呢？如今，你無需糾結了，因為數字PCR（digitalPCR）來了。盡管這兩種技術有些類似，都是估計起始樣品中的核酸量，但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量，而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域：拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究（如等位基因不平衡表達）、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。數字PCR 浚和(上海)儀器科技有限公司獲得眾多用戶的認可。安徽實驗室數字PCR價格

個體化診療通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技 術展現出了 的檢測精度，此外，dPCR***定量的優勢也能充分發揮出來了，可以監控突變含量變化，做到及早發現耐藥。2.）基因表達分析伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細胞白血病（CML）患者延長生存期，但是臨床上發現，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉錄產物表達量有很大的關系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉錄產物進行測定，結果檢測下限可以達到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優勢四川立式數字PCR聯系方式數字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，有想法可以來我司咨詢！

目前數字PCR技術在臨床領域已經有著非常***且***地應用，例如在病原微生物檢測中的應用：HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等；在產前診斷中的應用：13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優生五項的病毒檢測等；在**靶向***相關基因檢 測中的應用：肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因擴增檢測、神經膠質瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關基因檢測為例，在**形成的超早期,會出現**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高，目前只有數字PCR技術可以檢測出來。另外進行個體化***時,需要對基因組樣本進行分析,此時利用數字PCR技術也能**提高結果的可信性,進而建立合理***方案。

dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中，每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后，有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品，包括微孔板，毛細管，油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量，根據泊松分布的原理，反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算，從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。數字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎您的來電！

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