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來源: 發布時間:2023-12-08

詳細步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,0.1%消過毒的醋酸中,4℃放置,并不時振蕩;4.48h后取上清,4000轉離心30min后,取上清;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存。有時可繼續向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重復以上步驟,以制備更多的鼠尾膠。在使用時,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,再按以下步驟包被培養器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無菌的培養器皿的生長面內壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2)若包被的是培養瓶,可向培養瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內后,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養皿或板的話,可將培養皿或板放在已消毒的飯盒內,將浸有氨水的棉球放入飯盒內,蓋緊飯盒蓋,四周用封口膠封死。通常情況下骨質總量中的鈣、鎂、磷等無機物質光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機物質卻要占超過80%。合肥鼠尾膠原進貨價

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鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1.主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,用75%的乙醇浸泡5min。將尾巴剪開,去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,將肌鍵置于平皿中剪碎,按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,將肌鍵分散于醋酸溶液中,4℃放置一周,然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成膠凍狀凝膠,置于冰箱4℃保存。杭州正規鼠尾膠原進貨價我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。

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含細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值)。加入760μL的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。

膠原蛋白的功效與作用:可以預防心血管病。研究表明,膠原蛋白可以降低血甘油三酯和膽固醇,并可增高體內某些缺乏的必需微量元素,從而使其維持在一個相對正常的范圍之內,是一種理想的降血脂食品。此外,膠原蛋白在協助機體排出鋁質,減少鋁質在體內聚集方面也有獨特之處。鋁對人體有害,研究表明,日前逐漸增多的老年癡呆癥與鋁的攝入量有關,同時膠原蛋白有加速血紅蛋白和紅細胞生成的功效,它具有改善循環、對、缺血性腦病有利。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,可用于化妝品,工業和食品生產等領域。

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膠原蛋白的提取方法:1.堿法提取:堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%~1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解,因此得到的水解產物分子量比較低。所以,若想保留膠原的三股螺旋結構,此法不可取。2.鹽法提取:鹽法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下,當鹽的濃度達到一定量時,膠原溶解。并且可采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。制備鼠尾膠原:取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘。成都正規鼠尾膠原廠家

從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。合肥鼠尾膠原進貨價

鼠尾膠原,10mg包裝,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,容量瓶配制比較準確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z準確),加入盛膠原的瓶中,輕輕顛倒,不要震蕩,蛋白容易起泡。幾分鐘即可,蛋白質非常好溶解。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大點的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一檔就行,避免加入氣泡。然后4度過夜除菌。4.第二天將上層膠原溶液分裝進EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷凍。合肥鼠尾膠原進貨價

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