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來源: 發布時間:2024-08-12

PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內24h遇醋酸發生沉淀,胃粘蛋白則除外。提供糖原染色試劑盒哪里買

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糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結合,紅色,定位于胞漿上。3、應用隨著醫學實驗技術的發展,糖原染色應用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等湖南哪家生產糖原染色試劑盒取材必須新鮮,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要。

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糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應,染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質量和環境溫度,SO濃度高,染色時間適當縮短;環境溫度高,染色時間也應適當縮短,反之則需適當延長反應時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經消化處理的切片染色陰性,不經消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現配現用,用過一次即應廢棄。各種試劑必須是化學純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。

糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。切取材料時刀要銳利,避免因擠壓細胞使其受到損傷。

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糖原染色――檢查項目的注意細節:其判斷標準隨細胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。安徽口碑好的糖原染色試劑盒哪里買

故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。提供糖原染色試劑盒哪里買

染色的一般原則:1.熒光素產品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細胞儀只可檢測單細胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細胞懸液,細胞數量不應低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養細胞。如果是貼壁細胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。提供糖原染色試劑盒哪里買

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