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來源: 發布時間:2024-08-27

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應,染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質量和環境溫度,SO濃度高,染色時間適當縮短;環境溫度高,染色時間也應適當縮短,反之則需適當延長反應時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經消化處理的切片染色陰性,不經消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現配現用,用過一次即應廢棄。各種試劑必須是化學純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。上海提供糖原染色試劑盒廠家現貨

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特染的應用價值:現代病理學中免疫組織化學技術、電子顯微鏡技術以及其它細胞及分子生物學技術應用日益普遍,但由于這些技術要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫院是比較難以接受的。而組織化學技術則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應用價值。比如,當細胞中出現色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現均一化學物質是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術區別起來很簡單,所以組織化學技術,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術~安徽提供糖原染色試劑盒生產廠家本試劑盒常用于常規組織切片染色,對于細胞、極其薄的切片。

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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。

特殊染色方法選擇應遵循:染色結果對比鮮明、結果易保存、陽性突出的染色方法;突出的陽性結果在于所選擇方法表達的色調及如何進行背景的復染。結果能夠長時間保存、不褪色對于后續的調閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質,甲基紫染色法雖然流程較為簡單,但結果不易保存,陽性對比度相對不突出;剛果紅染色法陽性結果明顯,長時間保存不褪色,流程簡便,更是實用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結果對比度相對欠佳,與其他幾個染色法相比,多不選擇使用。糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診。

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糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規固定,常采用10%的福爾馬林,常規脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍。11、逐級常規乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。取材必須新鮮,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要。山東哪家生產糖原染色試劑盒廠家直銷

切取的材料應小而薄,便于固定液迅速滲入內部。上海提供糖原染色試劑盒廠家現貨

粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性。(3)遇醋酸發生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結果;中性粘液性物質,某些酸性粘液物質呈紅色,核呈藍色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質。操作方法:(1)切片常規脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規脫水、封片上海提供糖原染色試劑盒廠家現貨

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