原代細胞的培養與建系細胞的來源多樣，培養方法也各不相同，凡是來源于胚胎、組織部位及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化，經大量擴增后所形成的生物學特性穩定的克隆化細胞群，稱之為細胞株或克隆細胞。此過程稱為細胞的純化或細胞克隆。這些基本技術是從事細胞培養工作的基礎，只有熟悉和掌握了基本技術,才可能更快捷地學習和掌握其他方法,本章重點敘述常用的基本技術。靠前節原代細胞的取材人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，是進行細胞培養的靠前步，若取材不當，將會直接影響細胞的體外培養確定一種特定細胞類型在低至無血清培養基中正常生長和功能所需的較低條件。濟南原代細胞分離試劑盒服務電話

傳代接種：當原代培養瓶中的細胞已經生長且布滿了所有可用的培養基質后，它們必須進行傳代以便為繼續生長提供空間。這通常需要將細胞盡可能輕柔地從基質上用胰酶消化下來。這些酶類似于原代培養中使用的酶，它能夠打斷使細胞粘附到基質上的蛋白鍵。有些細胞株可以通過輕輕刮除培養瓶底部的細胞加以收集。收集之后，將細胞懸液進行進一步的分散并置于新的培養瓶中。當細胞過多時，則可以用合適的低溫保護的試劑，如二甲基亞砜或甘油進行小心冰凍，然后置于低溫環境（－130℃以下）中，直到需要再次使用。青島原代細胞分離試劑盒生產廠家可以在接種后先將培養瓶置培養箱內培養3h到5h。

原代細胞與細胞系該如何選：原代細胞生長緩慢，一般認為，原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40-50代，這種傳代細胞叫做細胞株。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有變的特點，從而可能無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。

原代細胞的培養和維持：(1)原代細胞的培養方法原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的開始培養，是建立細胞系的靠前步，是一項基本技術。原代細胞較接近和較能反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。①組織塊培養法組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。為促進組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養瓶底壁上。

原代細胞標準化培養：由于每種原代細胞培養的條件迥異，而且每個實驗室都摸索出自己的培養條件，而對于一個特定的組織塊，所用培養條件不一樣，得出的所需細胞族群就不一樣，因為每種組織塊都含有不同種類的細胞群，而每一種細胞群在所選定的培養條件下（比如所選蛋白分解酶的種類和條件，細胞因子的種類，基礎培養基的種類或者是培養時間長短）都會得出不同的結果。由于各實驗室采取不同的培養條件，即使是同一塊心組織就有可能造成A實驗室獲得30%的心肌細胞，70%其他種類細胞，而B實驗室卻能獲得70%所需心肌細胞，30%為成纖維、脂肪等種類。這樣的話，即使是做同一項目的實驗，就有可能得出相反的科學結論。因此，早在2004年，美國科學界就質疑之前以原代細胞為主的科研文章，并同時提出原代細胞標準化培養的概念取樣后培養時間較少需要一周以上的時間，期間可換液或者傳代。武漢原代細胞分離試劑盒銷售廠家

加入的培養液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。濟南原代細胞分離試劑盒服務電話

原代細胞的定義：原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和部位后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，我們通常把靠前代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞因為可以模擬機體的功能，主要用于：生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究。原代細胞對解凍過程非常敏感，因此將小瓶置于37℃水浴鍋中，保持并輕輕旋轉直到內容物剛剛解凍是很重要的。然后應立即從水浴中取出小瓶，并轉移到無菌操作臺。確保您的培養瓶在解凍前已經準備就緒，以便可以立即用于接種細胞，并置于培養箱中，使用cellsystems的原代細胞時，復蘇的時候不建議離心，第二天換個液就可以。濟南原代細胞分離試劑盒服務電話