具膜囊泡，當我們使用常規方法分離這些結構時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體（exosome）適用于通過特殊手段拿到的由胞內體來源的釋放到細胞外的膜泡結構。建議對細胞外囊泡進行細分時使用物理上的界定如小細胞外囊泡（sEV）和中/大細胞外囊泡（m/lEV），或者高密度囊泡（highdensity）和低密度囊泡（lowdensity）等，同時也建議使用表面蛋白來界定如CD63+CD81+細胞外囊泡等。當使用exosomes等稱呼時應當進行嚴謹的實驗證明使用的“exosomes樣品”是由胞內體途徑產生的。小和同學：都是細胞外囊泡，外泌體和微囊泡有啥區別？小光老師：外泌體和微囊泡的區別在于其生成的方式不同。從晚期內體來源產生的細胞外囊泡稱為外泌體，從細胞膜直接出芽產生的細胞外囊泡稱為微囊泡。外泌體的提取方法：密度梯度離心。深圳外泌體提取試劑廠家供應

作為一種分子通斷開關的KRAS發生突變時會處于“開啟”狀態。在80%～95%的胰腺導管腺病（PDAC）當中，這個基因發生突變，這也是這種一些疾病中較為常見的突變。這些研究人員證實iExosome能夠運送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子，并且比他們的合成對應物脂質體（liposome）更加高效。脂質體不具有外泌體表現出的天然復雜性和優勢。德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學助理教授ValerieLeBleu博士說，“我們的研究提示著與脂質體相比，外泌體表現出運送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優異能力。我們也證實外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環單核細胞的吞噬作用。北京外泌體提取試劑銷售廠家外泌體的提取分離：超濾離心。

外泌體的提取分離：1、PEG-base沉淀法。聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒，現在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物，機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等，因此發表文章時易受質疑。2、試劑盒提取。近幾年來，市場上已出現各種商業化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設計的過濾器過濾掉雜質成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。這些試劑盒不需要特殊設備，隨著產品不斷更新換代，提取效率和純化效果逐漸提高，因而逐漸取代超速離心法并推廣開來。有些試劑盒操作簡便，不用超速離心，同時可獲得高純度和高回收率的外泌體。

外泌體的形成與鑒定：首先，細胞膜內陷形成一個杯狀結構，包括細胞表面蛋白和與細胞外環境相關的可溶性蛋白，導致早期胞內體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結構直接和已經存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內質網也能協助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內體(late-sortingendosomes，LSEs)，較終形成MVBs(也稱為多囊內小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內凹(即質膜雙凹)形成的，這一過程導致MVBs含有多個ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調節蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點。

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法，主要用于生物大分子的分離、純化。將其應用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結合，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別，這使得提取的外泌體純度高，但是產量低。Zarovni等分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法，從血漿和細胞上清中提取外泌體蛋白，結果表明，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標記蛋白(Alix、CD9、CD63)，同時，ELISA和PCR結果也證明了該方法的可行性。外泌體提取：用這種聚合物沉淀具有許多優點，包括對分離的外泌體影響小、pH中性等。長沙外泌體提取試劑平均價格

用于外泌體提取的體液收集注意事項：選擇血清還是血漿？推薦大多數研究選擇血漿。深圳外泌體提取試劑廠家供應

外泌體提取：尺寸排阻色譜。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實現分離大分子。該技術應用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移，而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。此外，可以將不同的洗脫溶液應用于該方法。與離心方法相比，色譜分離已被證明具有更多優勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會改變囊泡的結構。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術。不過，該方法耗時較長，不適合大量樣本處理深圳外泌體提取試劑廠家供應