注意事項(xiàng):染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時(shí),較好一張玻片撈一個(gè)組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時(shí)也利于脫蠟(有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候,達(dá)不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時(shí),一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時(shí)間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,以避免脫蠟時(shí)把標(biāo)簽紙也浸沒(méi),致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。上海口碑好的糖原染色試劑盒

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開(kāi)應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕叮舫蓤F(tuán)或沒(méi)有氣味,則不能用,配制時(shí)使用的容器、藥勺、稱(chēng)藥天平與稱(chēng)藥紙等必須潔凈、無(wú)污染。新配制好的Schiff劑為無(wú)色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過(guò)對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間。山東正規(guī)糖原染色試劑盒服務(wù)電話(huà)急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞POX染色多呈細(xì)小顆粒弱陽(yáng)性反應(yīng)。

糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng):1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果。需使用一張陽(yáng)性對(duì)照片驗(yàn)證酶的活性。2、過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,氧化時(shí)溫度以18~22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過(guò)多的陽(yáng)光和空氣,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類(lèi)別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來(lái)水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。5、在過(guò)碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類(lèi)別等決定。6、況冶切片染色時(shí)間盡量要短。
醫(yī)院檢驗(yàn)中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后過(guò)濾。配好后液體為無(wú)色透明,保存于4℃冰箱中。2.過(guò)碘酸作用液:過(guò)碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,或取過(guò)碘酸鉀(1tI04)0。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,再加濃硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水。[操作]_x005f_x005f_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內(nèi)10分鐘。(2)水洗數(shù)次后,對(duì)照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對(duì)照,另一半做測(cè)定。(3)水洗后,滴加過(guò)碘酸數(shù)滴于涂片上,作用10分鐘后,再水洗數(shù)次。本試劑盒適用于骨髓細(xì)胞涂片,血液細(xì)胞涂片。

糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。哪家提供糖原染色試劑盒銷(xiāo)售廠(chǎng)家
冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。上海口碑好的糖原染色試劑盒
PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類(lèi)的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類(lèi)的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。上海口碑好的糖原染色試劑盒