紫外可見分光光度計目前已被許多人熟知并利用,懂行的人看到說明書中有雙通道的介紹,下意識的覺得在使用上會比較麻煩。其實不然,它的操作原理和普通的光度計的原理是相同的,只要對普通的儀器的工作原理有所了解,這種光度計的使用方法就比較好掌握了。至于雙通道的設(shè)計,這只是在設(shè)計上的一個小小的進步,其中一個通道只是用來存放空白樣品的。所以操作者在使用時,事先要把比色皿準(zhǔn)備好,然后把兩個通道先都加滿空白液,接著把基準(zhǔn)數(shù)調(diào)整好。其中的一個調(diào)整到零后要把另一個所處的位置記錄下來。位置的距離就是測量后的誤差,這個數(shù)據(jù)也比較關(guān)鍵,結(jié)尾計算時要用到。結(jié)尾將其中的一個通道換成要測量的樣品,做好對樣品的測量就基本結(jié)束了測量的過程。單色器的主要作用是將復(fù)合光分解成單色光或有一定寬度的譜帶。高效紫外可見分光光度計比較
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)據(jù)處理系統(tǒng):主要有計算機、數(shù)據(jù)通信部件和儀器控制及數(shù)據(jù)處理軟件組成。通常由檢測器將光信號轉(zhuǎn)換成電信號后,還須經(jīng)過一定的信號處理器處理,如對電信號進行放大、衰減、積分、微分、相加、差減等;也可通過整流使其變?yōu)橹绷餍盘枺驅(qū)⑵滢D(zhuǎn)變成交流信號。處理的目的是將檢測器檢測到的信號轉(zhuǎn)變成一種可以被人讀出的信號,如可用檢流計、微安計數(shù)字顯示器、計算機顯示和記錄結(jié)果。目前,紫外可見分光光度計等光譜儀器大多數(shù)是通過專門的操作軟件在計算機中進行數(shù)據(jù)處理,可進行儀器操作、定性定量分析、記錄保存等。中國**紫外可見分光光度計對比常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器。
紫外可見分光光度計的主要性能指標(biāo):1、精密度。紫外可見分光光度計等儀器的精密度是儀器對同一樣品平行測定多次所測得的數(shù)據(jù)問相互一致性的程度。它是表征儀器測定隨機誤差大小的一個量。按照國際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(簡稱IUPAC)的有關(guān)規(guī)定,精密度通常用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(即RSD)來量度。即使同一儀器,對不同檢測項目、濃度水平等,精密度不同。2、靈敏度。儀器的靈敏度是指儀器區(qū)別具有微小差異濃度分析物能力的度量。IUPAC的規(guī)定,靈敏度的定量定義是校正靈敏度,它是指在測定濃度范圍中校正曲線的斜率。在分析化學(xué)中使用的許多校正曲線都是線性的,一般是通過測量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液來求得。光譜儀器分析中,有該儀器習(xí)慣使用的靈敏度的概念,如在原子吸收光譜法中,常用“特征濃度”即所謂1%凈吸收靈敏度來表示。在原子發(fā)射光譜法中也常采用相對靈敏度來表示不同元素的分析靈敏度,它是指能檢出某元素在試樣中的較小濃度。
紫外-可見分光光度計是由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈,可見光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種。可見光區(qū)的測量用玻璃吸收池,紫外光區(qū)的測量須用石英吸收池。檢測器的功能是通過光電轉(zhuǎn)換元件檢測透過光的強度,將光信號轉(zhuǎn)變成電信號。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器。分光光度計的分類方法有多種:按光路系統(tǒng)可分為單光束和雙光束分光光度計;按測量方式可分為單波長和雙波長分光光度計;按繪制光譜圖的檢測方式分為分光掃描檢測與二極管陣列全譜檢測。分光光度計的鎢燈壽命無法延長,氘燈如果不用的時候,可以關(guān)閉,開機要預(yù)熱時間。
對于紫外可見分光光度計,在比較大程度上主要是應(yīng)用在檢定物質(zhì)上,對于現(xiàn)在非常多的藥學(xué)機構(gòu),在一定程度上都非常需要紫外可見分光光度計的參與。其次就是在與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照。再者就是對于純度上的檢驗,現(xiàn)在有非常多的藥學(xué)還有物理機構(gòu),在紫外可見分光光度計的要求上都非常高,主要還是因為在檢測物質(zhì)上還是需要有相當(dāng)程度上的保證,對于儀器上的誤差都是能減少就盡量減少。對于現(xiàn)在紫外可見分光光度計的使用,在比較大程度上都是需要非常專業(yè)的人員。不管是在操作上還是在保養(yǎng)上,對于這樣精密的儀器都是要非常重視。分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。三用紫外可見分光光度計
光源:光譜分析中,光源是提供足夠的能量使試樣蒸發(fā)、原子化、激發(fā),產(chǎn)生光譜。高效紫外可見分光光度計比較
在使用紫外可見分光光度計時應(yīng)該注意哪些問題:第1,要掌握好儀器日常維護的主要方法,在一定時間段內(nèi)對儀器進行維護和和測試,讓儀器時刻處于較佳狀態(tài)。因為一起使用一定時間后,內(nèi)部可能滲入塵埃,血藥專業(yè)的人員對其進行清理,不然會影響機器的精度。第二,要注意紫外可見分光光度計設(shè)備存放的環(huán)境,溫度和適度,還有氣體都能在一定程度上影響機械零部件的性能,比如局部可能會出現(xiàn)腐蝕現(xiàn)象。這就能夠?qū)C械系統(tǒng)的靈活性造成影響。第三,使用過程中,切記不要將試劑等樣品放在一起的表面,較大限度的保持機器和樣品的清潔。只有有效的保證機器清潔才會在樣品檢測中得到較真實的數(shù)據(jù),才會做出較科學(xué)的實驗。高效紫外可見分光光度計比較