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來源: 發布時間:2023-10-12

由于硬骨魚和人類在骨骼發育過程中的基因、信號通路有高度同源性,而且與其他的動物模型相比,斑馬魚具有個體小適合高通量化學篩選、幼魚身體透明易于觀察骨骼發育的特點,所以近年來以斑馬魚為模型的骨骼研究逐漸成為這一領域的熱點。斑馬魚從前向后的脊椎發育過程是非連續的,而是分成兩個不同的區域:前域(包括第3塊椎骨)和后域(包括第4-31塊椎骨)。將斑馬魚脊椎骨鈣化過程分成兩個不同區域是基于第2和第3椎骨的出現晚于第4椎骨。我們利用斑馬魚骨骼發育的規律,攝入生長發育促進劑的斑馬魚脊椎骨發育會加快。脊椎骨染色應用與鈣特異性結合的熒光染料(呈綠色),經熒光顯微鏡觀察脊椎骨的數量。斑馬魚模型評價基因毒性。重慶市藥物安全評價公司

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隨著電子產品的大量使用,用眼的時間和強度已遠超過去,用眼過度引起一系列視力問題。研究表明,高度近視、視網膜疾病、白內障、眼干燥關節綜合征均與眼細胞凋亡相關。斑馬魚的眼部血管結構跟人非常相似,斑馬魚視網膜結構也跟人高度相似。用霉酚酸嗎啉乙酯可以誘發斑馬魚眼細胞凋亡,模擬人的眼部疾病。用特異性熒光染色(呈綠色),患有眼疾的斑馬魚眼細胞凋亡較正常斑馬魚明顯增多,在熒光顯微鏡下可以觀察到。我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和藥物組。其中正常對照組未攝入霉酚酸嗎啉乙酯,模型對照組與服用眼保護劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。眼保護劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時攝入藍莓葉黃素酯之類的眼保護劑。服用一段時間眼保護劑后,我們對斑馬魚整體做凋亡細胞特異性染色,觀察細胞凋亡,同時制作成病理切片觀察眼部的病理結構變化。藥品功效檢驗斑馬魚實驗模型-藥物、化妝品功效評價。

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我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用免疫調節劑組。其中正常對照組未注射長春瑞濱,模型對照組與服用免疫調節劑組都注射了等量的長春瑞濱(長春瑞濱通過靜脈注射的方式攝入到斑馬魚體內)。服用免疫調節劑組在注射長春瑞濱后攝入異丙肌苷等免疫調節劑。服用一段時間免疫調節劑后,我們觀察斑馬魚T細胞熒光強度變化。可以看到,免疫調節劑組T細胞熒光強度與未注射長春瑞濱的正常對照組比較相似,沒有出現明顯的T細胞減少情況。

腸道消化是食物在消化道中分解的過程,包括機械性消化(通過消化道肌肉搜索將食物與消化液混合并向消化道遠端推送)和化學性消化(通過消化腺分泌的消化酶將大分子分解為小分子物質的過程)。腸道內的消化液包括胰脂肪酶、胰蛋白酶、胰淀粉酶等。在受精后的26-126h,斑馬魚腸道的管腔形成,內胚層分化出連續的有功能的腸道上皮。斑馬魚腸道肌肉發達,可分為兩層平滑肌,有利于食物的蠕動消化。通過特異性的檢測試劑盒檢測OD值,可以量化斑馬魚體內胰脂肪酶和胰蛋白酶含量。藥物臨床前研究實驗。

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斑馬魚消化道的解剖結構和細胞結構與人類消化道相似,具有同心圓層的內上皮、結締組織、環狀肌肉和外縱肌層。三硝基苯磺酸(TNBS)的乙醇溶液造模法屬于正常免疫系統下的半抗原誘導性模型,當TNBS的乙醇溶液灌腸時,乙醇作為有機溶劑溶解腸粘膜表面的黏液,暫時性破壞腸粘膜屏障,使TNBS和腸組織蛋白結合形成完全抗原,導致腸黏膜免疫系統針對該抗原的遲發性變化反應,并造成腸黏膜的損傷。杯狀細胞是黏蛋白的主要來源,其數量和形態反應腸粘膜的健康狀況,是腸粘膜異常的敏感指標。由于斑馬魚通體透明的特點,有兩種方法檢測結腸炎的防治作用。1.觀察腸腔面積的變化,2.通過特異性染料(呈藍色)對腸道的杯狀細胞染色,通過觀察杯狀細胞數量來判斷腸粘膜的損傷情況。評價疏肝解酒酒精性脂肪肝防治功效。體外實驗對其藥效進行評價

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蛋黃粉中60%為脂類,用蛋黃粉喂食斑馬魚,可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高,從而建立斑馬魚血脂高癥模型。經過油紅O特異性脂肪染色(與組織內甘油三酯等脂肪滴結合呈橘紅色),血脂高斑馬魚血管內肉眼可見明顯的脂質聚積,通過靜脈注射,可見熒光標記膽固醇的積累。我們評價斑馬魚降低血脂功效有4個指標:1.斑馬魚血脂表型圖;2.斑馬魚總甘油三脂含量;3.斑馬魚膽固醇表型圖;4.斑馬魚總膽固醇含量。1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用降脂產品組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少。2.本實驗證實了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀類降脂產品具有明顯的降脂降膽固醇作用。重慶市藥物安全評價公司

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