穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！PEI轉(zhuǎn)染試劑使用的時候有什么注意事項？高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段，以固體粉末形式提供，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣有誰用過Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑？

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！近期還有PEI試用裝申請活動，可關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio

Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細(xì)胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時間，加快項目進(jìn)度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預(yù)測產(chǎn)量；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究。PEI轉(zhuǎn)染試劑如何做殘留檢測？

PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮，可制備大量轉(zhuǎn)染試劑KyforaBiobyPolysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉(zhuǎn)染效果，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。PEIMAX40K是由KyforaBiobyPolysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉(zhuǎn)染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEIMAX，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明，在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強(qiáng)。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系，實現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本（部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本）。配制PEI轉(zhuǎn)染試劑的注意事項有哪些？高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

PEI轉(zhuǎn)染試劑主要用于大規(guī)模的蛋白表達(dá)和病毒包裝。高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences，后續(xù)購買請認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題，歡迎咨詢上海曼博生物!高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣