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親水作用色譜柱（HILIC）的分離特性與極性化合物分析應用
來源：
發布時間：2026-06-01
常規反相液相色譜柱（C18、C8）對非極性、弱極性化合物分離效果優異，但對強極性水溶性小分子化合物保留能力極弱，這類物質極易隨流動相死體積快速流出，無法實現有效分離，是常規色譜分析的難點。親水作用色譜（HILIC）的出現完美解決了強極性化合物分離難題，HILIC色譜柱作為專屬分離載體，成為水溶性極性小分子、極***物、糖類、氨基酸、核酸類化合物分析的**工具。HILIC色譜柱的分離機制區別于正相、反相色譜，是一種復合型分離機制，**以液液分配為主，輔以氫鍵作用、靜電吸附、親水吸附多重作用。HILIC固定相為強極性材質，包括氨基、氰基、二醇基、兩性離子、硅膠裸柱等，在高比例有機相流動相條件下，固定相表面會吸附形成一層富水吸附層，待測極性化合物在有機流動相和固定相富水層之間進行分配，極性越強的化合物在富水層中的分配比例越高，保留時間越長，從而實現極性化合物的有效保留與分離。相較于常規反相色譜，HILIC色譜柱具有獨特的分離優勢。其一，對強極性小分子具有優異的保留能力，可有效分離糖類、氨基酸、維生素、極***物中間體、有機酸等反相色譜無法保留的物質，填補了極性化合物分離的技術空白；其二，流動相以高比例乙腈為主，體系黏度低、色譜柱背壓小，分離穩定性更高，且與質譜檢測器兼容性較好，離子抑制效應弱，適合液質聯用痕量分析；其三，峰形對稱性好，極少出現拖尾現象，定量準確性更高。主流HILIC色譜柱分為五大品類，適配不同極性樣品體系。兩性離子HILIC柱分離選擇性比較好，適配極性離子型化合物、小分子兩性物質分離，抗基質干擾能力強；二醇基HILIC柱穩定性高、無次級吸附，適合糖類、糖苷類天然產物分析；氨基HILIC柱對糖類化合物特異性保留強，是單糖、多糖、寡糖分離的**色譜柱；裸硅膠HILIC柱適配簡單極性小分子分離，成本低廉；氰基HILIC柱兼顧極性與弱極性分離能力，適配極性與弱極性混合樣品體系。在實際應用中，HILIC色譜柱廣泛應用于多個高精尖領域。生物醫藥領域，用于極***物、代謝產物、氨基酸、核酸堿基的定量分析，支撐藥物代謝動力學研究；食品檢測領域，用于果蔬糖分、水溶性維生素、食品添加劑極性組分的檢測；天然產物領域，用于中藥水溶性活性成分、糖苷類化合物的分離純化；環境領域，用于水體極性有機污染物、小分子有機酸的篩查檢測。HILIC色譜柱使用需遵循專屬條件，**要求流動相保持高有機相比例，若水相比例過高，會破壞固定相表面富水層，導致保留能力大幅下降。同時，該類色譜柱平衡時間較長，更換流動相后需充分平衡色譜柱，保證分離重復性。作為極性化合物分離的****載體，HILIC色譜柱有效完善了液相色譜分離體系，成為現代復雜樣品全組分分析不可或缺的關鍵部件。
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