VIC與 FAM 類似,是一種熒光報告基團,可標(biāo)記在引物或探針上用于熒光定量 PCR。它在 PCR 過程中,隨著引物或探針與目標(biāo) DNA 的結(jié)合以及 PCR 產(chǎn)物的擴增,會發(fā)出特定波長的熒光,其熒光信號強度與 PCR 產(chǎn)物的量成正比,通過檢測熒光信號的變化來實現(xiàn)對目標(biāo) DNA 的定量分析。特點:激發(fā)波長和發(fā)射波長與 FAM 有所不同,激發(fā)波長約為 538nm,發(fā)射波長約為 554nm,熒光顏色為黃綠色。VIC 常用于多重?zé)晒舛?PCR 中,可與 FAM 等其他熒光染料同時使用,實現(xiàn)對多個不同目標(biāo)基因的同時檢測,因為其光譜特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號之間的相互干擾。對于一些隱性遺傳疾病,熒光定量 PCR 儀可用于檢測個體是否為致病基因的攜帶者。蘇州JOE熒光定量PCR儀代理商

實時熒光定量 PCR 儀在多個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域:疾病診斷:可對病毒、細菌等病原體的核酸進行檢測,如、病毒、結(jié)核桿菌等,實現(xiàn)疾病的早期診斷。例如,在期間,實時熒光定量 PCR 儀是檢測核酸的重要工具,通過檢測患者樣本中病毒的核酸量,判斷是否以及的程度。疾病監(jiān)測:對于一些慢性疾病,如、心血管疾病等,實時熒光定量 PCR 儀可監(jiān)測相關(guān)基因的變化,輔助醫(yī)生了解疾病的發(fā)展進程、效果以及預(yù)測疾病的復(fù)發(fā)風(fēng)險。例如,通過檢測患者體內(nèi)特定基因突變的頻率和拷貝數(shù),評估的惡性程度和后的殘留情況。藥物研發(fā):在藥物研發(fā)過程中,可用于研究藥物對基因表達的影響,篩選具有潛在作用的藥物靶點。同時,還可監(jiān)測藥物過程中患者體內(nèi)基因的變化,為個體化提供依據(jù)。例如,通過檢測患者在使用某種藥物前后腫瘤細胞中相關(guān)基因的表達水平,判斷藥物是否有效,并調(diào)整方案。南通YELLOW熒光定量PCR儀價格使熒光信號能夠更準確地反映目標(biāo)核酸的真實拷貝數(shù),提高檢測的靈敏度和準確性。

熒光定量 PCR 儀是一種通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對 PCR 產(chǎn)物進行標(biāo)記跟蹤,實時監(jiān)測反應(yīng)過程的儀器。工作原理:在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個 PCR 進程。隨著 PCR 擴增的進行,每經(jīng)過一個循環(huán),熒光信號就會相應(yīng)增加。通過檢測熒光信號的變化,就可以判斷 DNA 的擴增情況,進而實現(xiàn)對初始模板的定量分析。常用的熒光化學(xué)物質(zhì)有 TaqMan 熒光探針和 SYBR 熒光染料等。TaqMan 探針法中,探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR 擴增時,Taq 酶的 5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 熒光染料特異性地摻入 DNA 雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的 SYBR 染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。
杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9600Pro作為一款**PCR儀器,其配備了一塊,這一設(shè)計在實驗過程中起著至關(guān)重要的作用。通過實時監(jiān)控運行狀態(tài),用戶可以直觀地了解PCR實驗的進展情況,保證實驗操作的準確性和實驗數(shù)據(jù)的可靠性。,為用戶提供了更為清晰、直觀的實驗信息展示界面。在進行PCR實驗的過程中,用戶可以通過顯示屏實時監(jiān)控儀器的運行狀態(tài)、反應(yīng)曲線、溫度曲線等關(guān)鍵數(shù)據(jù),了解實驗進展情況,及時發(fā)現(xiàn)異常情況并采取相應(yīng)措施。這種即時的反饋和監(jiān)控功能,有助于用戶提前發(fā)現(xiàn)實驗中可能存在的問題,減少實驗失敗的可能性,保證實驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。另外,,使得操作更加便捷、直觀。用戶可以通過觸摸屏或按鈕操作來進行儀器的控制和設(shè)置,從而實現(xiàn)快速、準確的實驗操作。顯示屏上顯示的實驗參數(shù)、曲線圖等信息清晰可見,使得用戶能夠輕松地進行數(shù)據(jù)分析和實驗結(jié)果的解讀。通過實時監(jiān)控運行狀態(tài),。用戶可以隨時查看儀器的運行日志和歷史數(shù)據(jù),了解實驗過程中的各個環(huán)節(jié),方便進行實驗結(jié)果的復(fù)現(xiàn)和對比分析。這種數(shù)據(jù)記錄和追溯功能,有助于用戶更好地管理實驗數(shù)據(jù),保證實驗的可追溯性和科研成果的可靠性。 這些算法可以去除背景噪聲、校正熒光信號的漂移,并對熒光信號的變化進行實時監(jiān)測和定量分析。

熒光染料法原理:一些熒光染料(如 SYBR Green I)能特異性地結(jié)合到雙鏈 DNA 上。在 PCR 反應(yīng)體系中,隨著 DNA 擴增產(chǎn)物的不斷增加,與雙鏈 DNA 結(jié)合的熒光染料也越來越多,熒光信號強度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關(guān)。通過檢測熒光信號的強度變化,就可以實時監(jiān)測 PCR 反應(yīng)的進程。過程:在 PCR 反應(yīng)的每一個循環(huán)中,當(dāng)溫度降低到退火溫度時,引物與模板結(jié)合,DNA 聚合酶開始延伸引物,合成新的 DNA 鏈。此時,熒光染料會結(jié)合到新合成的雙鏈 DNA 上,儀器會在特定的時間點檢測熒光信號的強度。隨著循環(huán)次數(shù)的增加,熒光信號逐漸增強,當(dāng)信號強度達到設(shè)定的閾值時,對應(yīng)的循環(huán)數(shù)被稱為閾值循環(huán)數(shù)(Ct 值)。定量依據(jù):在一定的范圍內(nèi),起始模板量與 Ct 值呈對數(shù)關(guān)系。即起始模板量越多,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)越少,Ct 值越小;反之,起始模板量越少,Ct 值越大。通過已知濃度的標(biāo)準品建立標(biāo)準曲線,再根據(jù)待測樣本的 Ct 值,就可以在標(biāo)準曲線上計算出其對應(yīng)的起始模板量。受到儀器的整體性能、光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計、熒光染料質(zhì)量以及數(shù)據(jù)處理算法等多種因素的綜合影響。泰州JOE熒光定量PCR儀功能
減少非特異性信號的干擾,從而提高檢測的靈敏度。蘇州JOE熒光定量PCR儀代理商
以下是一些判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個峰,而樣品和實驗條件均無變化時,可能是光路系統(tǒng)對熒光信號的檢測精度下降,導(dǎo)致熔解曲線的分析結(jié)果不準確,此時需要考慮對光路系統(tǒng)進行校準。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預(yù)期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設(shè)計、反應(yīng)條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測存在誤差,影響了對 DNA 雙鏈解鏈過程的準確監(jiān)測,需要對光路進行檢查和校準。蘇州JOE熒光定量PCR儀代理商