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鎮(zhèn)江JOE熒光定量PCR儀功能

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-11-26

Cy5.5 熒光定量 PCR 儀通過優(yōu)化光學(xué)系統(tǒng)和反應(yīng)體系,將檢測限降至 10 拷貝 /μL,其重要技術(shù)包括高數(shù)值孔徑(NA=0.8)的物鏡設(shè)計(jì)、低噪聲的制冷 CCD 檢測器(-20℃)以及高特異性的熱啟動(dòng) Taq 酶(酶活性抑制率 > 99% at 4℃)。在臨床體液樣本(如腦脊液、胸腹水)中微量病原體核酸檢測中,該儀器可有效檢測出低濃度的病毒或細(xì)菌核酸,例如在結(jié)核分枝桿菌(MTB)檢測中,傳統(tǒng) PCR 儀需靶標(biāo)濃度 > 100 拷貝 /μL 才能檢出,而該儀器可檢測到 10 拷貝 /μL 的 MTB 核酸,顯著提高了結(jié)核病的早期診斷率。此外,該儀器搭配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有莖環(huán)結(jié)構(gòu),可進(jìn)一步提高探針與靶標(biāo)結(jié)合的特異性,減少非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。臨床數(shù)據(jù)顯示,該儀器在體液樣本病原體檢測中的陽性檢出率比傳統(tǒng)方法提升 20% 以上,且特異性保持在 98% 以上。如 FAM、ROX 等常用染料的通道,以實(shí)現(xiàn)多重 PCR 檢測,同時(shí)對(duì)多個(gè)目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析。鎮(zhèn)江JOE熒光定量PCR儀功能

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Cy5.5 熒光定量 PCR 儀的重要優(yōu)勢在于其近紅外熒光檢測能力,該波長范圍(675-730nm)可有效避開復(fù)雜組織樣本中血紅蛋白、黑色素等物質(zhì)的可見光區(qū)熒光干擾,明顯降低背景信號(hào)。其適配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有優(yōu)異的光穩(wěn)定性,在長時(shí)間熒光采集過程中不易發(fā)生光漂白,確保信號(hào)穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,對(duì)于組織樣本中循環(huán) DNA(ctDNA)等低豐度靶標(biāo)檢測,該儀器通過高靈敏度光電倍增管,可捕捉到低至數(shù)十拷貝的靶標(biāo)核酸信號(hào),解決了傳統(tǒng)可見光熒光 PCR 儀在復(fù)雜樣本中檢測靈敏度不足的問題。例如在肺早期診斷中,可通過該儀器檢測患者血液中微量的 EGFR 基因突變,為臨床早期干預(yù)提供精細(xì)依據(jù)。南京Texas Red熒光定量PCR儀詢問報(bào)價(jià)熒光定量 PCR 儀重要功能包括準(zhǔn)確溫控模塊、多通道熒光檢測系統(tǒng)及數(shù)據(jù)分析軟件。

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YELLOW熒光定量PCR儀通過530nm激發(fā)光源,適配HEX、JOE、VIC等黃色熒光標(biāo)記,其多色檢測能力使其在SNP分型和基因表達(dá)分析中具有廣泛應(yīng)用。該儀器采用高靈敏度光電二極管作為檢測器,可區(qū)分熒光信號(hào)的微小差異,實(shí)現(xiàn)高精度定量。在SNP分型實(shí)驗(yàn)中,YELLOW通道可檢測HEX標(biāo)記的等位基因特異性探針,通過熒光信號(hào)強(qiáng)度差異判斷基因型。例如,某研究利用YELLOW熒光定量PCR儀對(duì)相關(guān)基因進(jìn)行分型,發(fā)現(xiàn)某SNP位點(diǎn)與疾病風(fēng)險(xiǎn)明顯相關(guān),為遺傳咨詢提供了科學(xué)依據(jù)。此外,該儀器還支持FAM、Cy5等多色熒光標(biāo)記,可同時(shí)檢測多個(gè)靶標(biāo)基因,提升實(shí)驗(yàn)通量。

熒光定量 PCR 儀作為分子生物學(xué)設(shè)備,其原理是在 PCR 擴(kuò)增過程中,通過光學(xué)系統(tǒng)實(shí)時(shí)捕獲熒光信號(hào)的動(dòng)態(tài)變化。與傳統(tǒng)終點(diǎn) PCR 能判斷靶標(biāo)有無不同,該設(shè)備可記錄每個(gè)擴(kuò)增循環(huán)的熒光強(qiáng)度,形成特征性擴(kuò)增曲線,結(jié)合閾值設(shè)定與數(shù)據(jù)分析算法,實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸靶標(biāo)的精細(xì)定量。其精細(xì)性源于雙重保障:一是熒光信號(hào)與擴(kuò)增產(chǎn)物量的線性關(guān)聯(lián),確保信號(hào)強(qiáng)度真實(shí)反映靶標(biāo)濃度;二是特異性引物與熒光探針的協(xié)同作用,避免非特異性擴(kuò)增干擾。該功能廣泛應(yīng)用于臨床病原體載量檢測(如、乙肝病毒)、基因表達(dá)量分析、轉(zhuǎn)基因作物定量檢測等場景,為疾病診斷、科研探索提供量化數(shù)據(jù)支撐,是分子診斷領(lǐng)域不可或缺的工具。純度差,含有蛋白質(zhì)、多糖、酚類等雜質(zhì),會(huì)抑制 PCR 反應(yīng),降低擴(kuò)增效率,影響熒光信號(hào)強(qiáng)度。

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VIC 熒光定量 PCR 儀內(nèi)置的 VIC 通道內(nèi)參校正系統(tǒng),通過在每個(gè)反應(yīng)體系中加入 VIC 標(biāo)記的內(nèi)參核酸(如管家基因或外源對(duì)照),可實(shí)時(shí)監(jiān)測 PCR 擴(kuò)增過程中的抑制因素(如樣本中的抑制劑、核酸提取效率差異),避免因擴(kuò)增效率不一致導(dǎo)致的定量誤差。在病原體耐藥基因檢測中,例如肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶耐藥基因(KPC)檢測,該儀器可同時(shí)檢測 VIC 標(biāo)記的內(nèi)參基因和 FAM 標(biāo)記的 KPC 基因,通過內(nèi)參信號(hào)校正 KPC 基因的熒光信號(hào),實(shí)現(xiàn)耐藥基因的精細(xì)定量。臨床應(yīng)用中,該儀器可根據(jù) KPC 基因的拷貝數(shù)判斷細(xì)菌的耐藥程度,為臨床選擇提供依據(jù)。此外,該儀器支持內(nèi)參信號(hào)的自動(dòng)校正算法,無需人工干預(yù),檢測結(jié)果的重復(fù)性(CV 值 < 2%)和準(zhǔn)確性(回收率 95%-105%)均優(yōu)于無內(nèi)參校正的 PCR 儀,適合臨床診斷級(jí)別的耐藥基因檢測。可通過 FAM 熒光信號(hào)定量分析外源基因插入拷貝數(shù),滿足農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)。徐州熒光熒光定量PCR儀功能

熒光定量 PCR 儀質(zhì)控模塊監(jiān)測擴(kuò)增效率,保障檢測結(jié)果可靠性。鎮(zhèn)江JOE熒光定量PCR儀功能

熒光定量 PCR 儀檢測依托實(shí)時(shí)熒光信號(hào)采集技術(shù),打破傳統(tǒng) PCR “終點(diǎn)檢測” 的局限 —— 在 PCR 擴(kuò)增的變性、退火、延伸循環(huán)中,儀器通過激發(fā)光激發(fā)反應(yīng)體系中的熒光染料,再由高靈敏度檢測器動(dòng)態(tài)捕捉熒光信號(hào)變化。其重要邏輯是 “熒光信號(hào)強(qiáng)度與靶核酸擴(kuò)增產(chǎn)物量正相關(guān)”:定性分析通過判斷 Ct 值(熒光信號(hào)達(dá)閾值時(shí)的循環(huán)數(shù))是否小于設(shè)定閾值,確定樣本中是否存在靶基因;定量分析則通過將樣本 Ct 值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(橫坐標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù)、縱坐標(biāo)為 Ct 值),計(jì)算靶核酸的精確濃度。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域的基因表達(dá)差異研究,以及臨床中的病原體篩查,如乙肝病毒載量監(jiān)測,相比傳統(tǒng) PCR 不僅實(shí)現(xiàn) “實(shí)時(shí)追蹤”,還將定量誤差控制在 5% 以內(nèi),明顯提升檢測準(zhǔn)確性。鎮(zhèn)江JOE熒光定量PCR儀功能

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