L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？L-谷氨酰胺（L-Glutamine）是細(xì)胞生長的必須氨基酸，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源，25%纖維二糖溶液，參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定，它的降解速率隨保存時間，保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺（L-alanyl-L-glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品，25%纖維二糖溶液，其在水溶液中穩(wěn)定性高，即可保持長時間穩(wěn)定的營養(yǎng)供給，也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液（L-alanyl-L-glutamineslution）可作為哺乳動物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比，25%纖維二糖溶液，L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性，作為添加物培養(yǎng)條件更加可控，可有效提高細(xì)胞活力。細(xì)菌類培養(yǎng)基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥芽瓊脂培養(yǎng)基等等。25%纖維二糖溶液
天然培養(yǎng)基：天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗室經(jīng)常使用外，也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基。例如，高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長速度較慢，一般適于在實(shí)驗室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。BM固體培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基需要考慮生長細(xì)胞所需的營養(yǎng)、酸堿度和水分含量等因素。
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學(xué)成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同，可完全由無機(jī)鹽或化合物組成，如：氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等，其組成成分已知，只要嚴(yán)格操作，各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細(xì)胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高，其價格相當(dāng)于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機(jī)鹽的合成培養(yǎng)基，只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng)，如培養(yǎng)亞硝化細(xì)菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的營養(yǎng)物質(zhì)，其中的個別或少數(shù)成分為未明化學(xué)成分的必須營養(yǎng)物，成為半合成培養(yǎng)基，如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有水、氮源、無機(jī)鹽（包括微量元素）、碳源、生長因子（維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等）等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長時間的貯存，必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，均改制成粉末。有些細(xì)胞需要在低溫下培養(yǎng)，這時需要特殊的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%還是10%CO2，或者根本沒有影響？一般培養(yǎng)基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時，細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10% CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5g時，則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。NaHCO3的作用：培養(yǎng)基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統(tǒng)，并采用開放培養(yǎng)，使細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶，再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度（5%） ，與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)，從而調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值。NEAA：非必須氨基酸，NEAA（非必需氨基酸） 是含幾種非必需氨基酸的合劑，添加到的原培養(yǎng)基不同，NEAA 也有不同的種類，比如添加至MEM的NEAA，含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。生長細(xì)胞需要的營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、微量元素和維生素等。B12肉湯培養(yǎng)基
細(xì)胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類。25%纖維二糖溶液
培養(yǎng)基按成分分類有哪些？按形態(tài)分類：培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài)，可分為液體、流體、半固體和固體4類，培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑，常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基，如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基。2、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉，使其具一定黏度，即成流體培養(yǎng)基。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度，降低空氣中的氧氣進(jìn)人培養(yǎng)基的速度，能使培養(yǎng)基保持較長時間的厭氧條件，有利于一般厭氧菌的生長繁殖，如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養(yǎng)基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養(yǎng)。25%纖維二糖溶液
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