分光光度計(jì)可分為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。項(xiàng)目對(duì)分析結(jié)果的影響1、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對(duì)應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長(zhǎng)。試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶(hù)獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息，也能提供精確度的信息，包括平均值和變異系數(shù)。根據(jù)所能測(cè)定的波長(zhǎng)范圍的不同，分光光度計(jì)可以分成紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)。河南火焰分光分光光度計(jì)推薦
在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí)，將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí)，測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度，以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì)，包括Eppendorf的所有儀器，都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶(hù)至少每周運(yùn)行一次自檢，但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器，通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。中國(guó)香港uv分光光度計(jì)型號(hào)紫外分光光度計(jì)的光譜是帶狀光譜。
可見(jiàn)分光光度計(jì)【原理】可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì)，基于樣品對(duì)單色光的選擇吸收特性可用于對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析。其定量分析根據(jù)相對(duì)測(cè)量原理工作，即選定樣品的溶劑(或空氣)作為標(biāo)準(zhǔn)試樣，設(shè)定其透射比為100%，被測(cè)樣品的透射比則相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到，在一定的濃度范圍，各參量遵循朗伯—比耳定律：A:吸光度T:相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)試樣的透射比I:光透過(guò)被測(cè)樣品后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度I0:光透過(guò)標(biāo)準(zhǔn)試樣后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度K:樣品溶液的比消光系數(shù)L:樣品溶液在光路中的長(zhǎng)度C:樣品濃度【儀器結(jié)構(gòu)】【使用方法】（1）開(kāi)機(jī)預(yù)熱儀器接通電源，微機(jī)進(jìn)行系統(tǒng)自檢，LCD顯示窗口顯示相應(yīng)的產(chǎn)品型號(hào)后，儀器進(jìn)入工作狀態(tài)。默認(rèn)的工作模式是T。注意：為使內(nèi)部達(dá)到熱平衡，開(kāi)機(jī)預(yù)熱時(shí)間不小于30分鐘。（2）改變波長(zhǎng)通過(guò)旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)手輪改變波長(zhǎng)，并在波長(zhǎng)觀察窗的刻度選擇所需的波長(zhǎng)。（3）放置參比與待測(cè)樣品選擇測(cè)試用的比色皿，把盛放參比和待測(cè)液的樣品放入樣品架內(nèi)，通過(guò)樣品架拉桿來(lái)選擇樣品的位置。當(dāng)拉桿到位時(shí)有定位感，到位時(shí)輕輕推拉一下以保證定位的正確。（4）調(diào)0%T、調(diào)100%T/0A為保證儀器進(jìn)入正確的測(cè)試狀態(tài)。
一些儀器具有多種光源供選擇：紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光（780nm至3,000nm）。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分（大約380nm到800nm）。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區(qū)域。分光光度計(jì)的帶寬（bandwidth）很大程度上依賴(lài)于單色儀的狹縫的寬度。可以投射出實(shí)驗(yàn)精確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿(mǎn)足多種實(shí)驗(yàn)需要。為了測(cè)量吸光值，分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管（photo-multipliertubes，PMTs）和光敏二極管。保持紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)表面和工作環(huán)境的清潔。
分光光度計(jì)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)核酸或者蛋白樣品濃度**常用的工具之一。儀器使用頻繁，但甚少見(jiàn)到有人維護(hù)。其實(shí)，保持分光光度計(jì)清潔、無(wú)污染是成功操作的關(guān)鍵。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會(huì)損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔，那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來(lái)加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔，但不是泡在清潔劑中。如有必要，拆下蓋子，用蘸有溫和清潔劑的軟布或無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。此外，平時(shí)不使用時(shí)，應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子，以免灰塵或其他污染物落入。消毒和凈化如果分光光度計(jì)被微生物所污染，那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化。首先，利用溫和的清潔劑來(lái)清潔設(shè)備。然后，用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要，拆下并清潔比色皿插槽。檢查組件維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit)，以評(píng)估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長(zhǎng)誤差。試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。關(guān)于儀器的系統(tǒng)誤差，可通過(guò)對(duì)分光光度計(jì)的定期校正來(lái)克服，若所需準(zhǔn)確度很高的測(cè)量，則必須天天校正。原子吸收分光分光光度計(jì)教程
紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng)，通常利用氘燈照明。河南火焰分光分光光度計(jì)推薦
由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。但是，當(dāng)吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直，此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。2、透射比（吸光度）準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結(jié)果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后，請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。河南火焰分光分光光度計(jì)推薦