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來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-10-17

數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術(shù)手段,源于于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中有一個(gè)或沒有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時(shí),加入可檢測熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時(shí),使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采集每個(gè)反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測樣本中的核酸濃度。基于分液方式的不同,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR、微滴數(shù)字PCR和芯片數(shù)字PCR,數(shù)字PCR儀器目前是市場測試校準(zhǔn)高的。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有想法的可以來電咨詢!青海立式數(shù)字PCR商家

數(shù)字PCR

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達(dá)到單個(gè)核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;●無需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進(jìn)行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進(jìn)行***定量,直 接獨(dú)處DNA分子的個(gè)數(shù);●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測:終點(diǎn)PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴(kuò)增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行***定量,如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;廣東便攜式數(shù)字PCR售后浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來電哦!

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MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR應(yīng)用范圍如下:a.動植物檢驗(yàn)檢疫,動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測;b.降低篩查成本、縮短檢測周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險(xiǎn)評估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo);c.可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。d.基因表達(dá)差異監(jiān)測單細(xì)胞研究:測序、PCRe.無創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾病:HBV、HIV、COVID-19定量

要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制,務(wù)必要了解PCR反應(yīng)過程中發(fā)生了什么。基本PCR運(yùn)行可以分為三個(gè)階段:指數(shù)期每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定**反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。線性期(高變異性)隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的PCR產(chǎn)物不再加倍。平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測)反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR產(chǎn)物將開始降解。因?yàn)槊總€(gè)樣品具有不同的反應(yīng)動力學(xué),所以每支試管或每個(gè)反應(yīng)將在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內(nèi),傳統(tǒng)PCR進(jìn)行測量,又稱為終點(diǎn)檢測。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來電!

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研究方向基因表達(dá)差異研究檢測時(shí)完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實(shí)現(xiàn)真正意義上的***定量,從而提供了比實(shí)時(shí)熒光定量PCR更精確的基因差異表達(dá)研究,尤其對于那些靶基因表達(dá)差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達(dá)分析、等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等。拷貝數(shù)變異(CNV)研究微滴化的樣品處理及檢測,這種擺脫Ct值的計(jì)算方法而直接獲取目標(biāo)基因的***拷貝數(shù),為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺無法達(dá)到的,因此采用數(shù)字PCR能夠有效對NGS、aCGH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,并具有成本低、通量高的特點(diǎn)。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有想法的可以來電咨詢!廣東便攜式數(shù)字PCR售后

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無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率 。而精細(xì)有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當(dāng)厲害了。青海立式數(shù)字PCR商家

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