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深圳流式數字PCR原理

來源: 發布時間:2021-08-03

       

       數字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。

       數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。


關于甲基化含量的鑒定。深圳流式數字PCR原理

深圳流式數字PCR原理,數字PCR

       我國***擁有完全自主知識產權的微滴式數字PCR儀MiniDrop?研發成功并投入生產。這是國內***微滴式數字PCR檢測系統,能廣泛應用于醫療、農業、環境等領域,未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創檢測成為可能。

       MiniDrop?數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成,該系統的**為微流控微滴生成技術,采用原創性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數量級,各項指標均超越國內外主流產品。 深圳流式數字PCR原理開放式平臺,支持用戶自行開發試劑、產品。

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       要了解為什么傳統 PCR 存在限制,務必要了解 PCR 反應過程中發生了什么。基本 PCR 運行可以分為三個階段:

指數期

       每個循環積聚的產物準確加倍(假定 ** 反應效率)。該反應具有高度特異性和精確度。出現指數式擴增,因為所有試劑均新鮮可用,反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍。

線性期(高變異性)

       隨著反應繼續,一些試劑因擴增而被消耗。反應開始減緩,并且每個循環的 PCR 產物不再加倍。

平臺期(終點:使用傳統方法進行凝膠檢測)

       反應停止,不再產生更多產物,并且如果放置時間夠長,PCR 產物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應動力學,所以每支試管或每個反應將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內,傳統 PCR 進行測量,又稱為終點檢測。

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數字PCR具備以下優勢:

● 靈敏度可達到單個核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數字PCR可以實現靶標DNA/RNA的生物濃縮;

● 無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進行***定量,直接獨處DNA分子的個數;

● 適合環境復雜樣品的檢測:終點PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復雜環境中的樣本進行***定量,如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等; MiniDrop?研發團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成。

深圳流式數字PCR原理,數字PCR

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數字PCR具備以下優勢:


· 能夠有效區分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數變異分析等。


· 數字PCR可開發針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環境提供檢測解決方案,該技術的應用范圍廣,尤其在液體活檢領域,已開發針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導臨床***的診斷,以便患者在后續得到更及時并且適當的***方案提供。 MicroDrop?數字PCR可廣泛應用于科研、醫療、出入境檢驗檢疫等領域。深圳流式數字PCR原理

無創產前篩查:低成本、快速。深圳流式數字PCR原理

       數字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。

       數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。 深圳流式數字PCR原理

浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商,致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來,持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。

浚和在不斷引進國內外先進儀器設備的同時,結合行業和市場需求,加強和客戶之間的溝通,并與國際上多家**儀器設備制造商保持著長期穩定的合作關系,不定期地與合作商進行技術交流,努力加強自身技術力量。公司配備了數名有著多年行業經驗的技術人員,依靠雄厚的技術實力、科學合理的配置方案、專業的安裝調試和周到的售后服務,得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經營產品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業的技術服務,如設備的維護、驗證等。

浚和儀器將始終以行業特點為立足點,以客戶需求為導向,不斷地提高自身專業技術能力,不停地完善客戶服務質量,在發展中保持創新的精神,力求與客戶共同進步,為行業的發展作出不懈的努力。

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