Tris-HCL與HEPES（供注射用）緩沖液應用對比

**常用的緩沖液有很多，如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大，***主要來對比兩種**常用的緩沖液：Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應用對比。

1、Tris-HCl緩沖液的應用Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系，穩定電泳過程中的pH，由于其具有弱堿性，水溶液的pH在10.5左右，可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液，根據緩沖理論，Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外，Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物（磷霉素等）的中間物，在化妝品、醫藥、涂料以及合成中均有應用。應用于體內時，Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿，在體液中與H2CO3結合，生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸，而且能降低CO2張力，有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果，其作用較碳酸氫鈉快而強。HEPES緩沖液對細胞無毒性作用，它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L，一般培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質體藥物等方面均有應用。

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在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中，HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物，需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌，并檢測過氧化物含量（如硫代硫酸鈉滴定法）。過氧化物會氧化敏感的生物分子，如硫醇基團和某些熒光染料。長期儲存的HEPES溶液應分裝并避免反復凍融。商業化的HEPES粉末也應避光保存，因其在光照下會逐漸降解。HEPES溶液的pH會隨時間緩慢變化，建議使用前重新校準。黑龍江高純度HEPES藥用采購注射用HEPES 中美雙報。

?7. 在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。?8. 與溫度變化的穩定性?HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%，優于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會導致降解，需避免高壓滅菌。?9.在流式細胞術中的優化?HEPES（10mM）可維持細胞懸液pH穩定，減少熒光染料淬滅。但需與FBS或BSA聯用以防止非特異性結合。艾偉拓HEPES現已登記且登記狀態為A，歡迎采購詢價

根據GIR的調研結果，全球4-羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在2021年的收入大約為55百萬美元，預計到2028年將達到73百萬美元，年復合增長率為%。該產品可以細分為HEPES粉末和HEPES溶液，并主要應用于細胞培養、蛋白質提取和其他領域。全球主要生產商包括Avantor、ThermoFisher、Merck、Lonza、Cytiva、PromegaCorporation、MPBiomedicals、SpectrumLaboratory、BiologicalIndustries、CaymanChemical、SERVAElectrophoresisGmbH、Bio-Techne、BioSpectra、Corning、FUJIFILMIrvineScientific,Inc.、DojindoLaboratories、XZLBio-Technology、SuzhouYacooScience、HaihangChemical、YunbangBio-pharmaceutical等公司。該產品的市場主要分布在北美、歐洲、亞太地區、南美洲以及中東和非洲等地區。其中，北美地區（美國、加拿大、墨西哥）、歐洲地區（德國、法國、英國、俄羅斯、意大利等）、亞太地區（中國、日本、韓國、印度、東南亞等）、南美洲（巴西、阿根廷等）以及中東和非洲地區（沙特阿拉伯、埃及、尼日利亞、南非等）都是該產品的重要市場。注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記。

HEPES(4-2-羥乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量為238.31，化學名：4-羥乙基哌口秦乙磺酸，分子式： C8H18N2O4S。HEPES是制備緩沖液的有機物質，為非離子兩性緩沖液，在pH 7.2 - 7.4范圍內具有很好的緩沖能力。 ***用于細胞培養，為了維持穩定的生理pH值，20下的pKa為7.55。 HEPES用于保護冷凍酶溶液免受冷凍誘導的pH變化的影響。 考慮到HEPES的光毒性(暴露于環境光會產生過氧化氫)，該緩沖劑配置溶液后，保存在黑暗的環境中，以便在后續實驗中正常工作。注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記實驗室采購；河南cas號7365-45-9HEPES

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與溫度變化的穩定性?HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%，優于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會導致降解，需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力，適合冷庫或冰上操作。在熱穩定性實驗中，HEPES緩沖液能有效維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES在高溫下的降解產物可能干擾實驗結果。在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中，HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。山東高純度HEPES使用注意事項