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藥物的安全性評估

來源: 發布時間:2023-08-03

基于斑馬魚模型實驗,可進行活性化合物發現、高通量藥物篩選、藥效評價、安全性評價、生物學質量控制等臨床前研究,實驗周期短、成本低,結果直觀,助力醫藥企業的藥物研發、品控及宣傳推廣。利用斑馬魚模型評價氧化應激。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87%,與哺乳動物對外源化學物質的防御機制相當,包括酶的誘導和氧化應激。當生物暴露在環境污染物中,生物可能會發生氧化應激,主要表現為活性氧(ROS)產生和消耗的不平衡。在需氧生物的活細胞中,活性氧被一種由水和脂溶性低分子量自由基清除劑、特異性抗氧化酶組成的抗氧化防御機制解。應用ROS特異性熒光檢測試劑,它的水解產物能被ROS氧化為高熒光物質,用多功能酶標儀檢測熒光值反映氧化應激的程度。本方法已被授予國家發明專利。斑馬魚模型評價聽毒***物的安全性評估

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對新藥研究開發過程和系統性的認識:新藥的開發和評價是一個伴隨新藥開發全過程的表現為不同階段性(臨床前、臨床開發階段)。與各專業相互關聯性的系統工程。但國內新藥研發者的認識程度遠遠不夠,停留在完成作業的思維層次。國內新藥開發企業:有效性綜合性研究和評價存在的問題(只見樹木不見樹林,重單個研究輕整體策劃一不重視非臨床和臨床藥效的相互呼應)。在臨床有效性研究中,也存在著沒有正確的試驗目的,研究方案設計不夠完善,使得的試驗結果不能對一些關鍵的問題做出回答;試驗中不能嚴格按方案內容執行,使試驗結果無法評價;試驗結果分析不夠等問題。藥物活性評估利用斑馬魚模型評價鎮痛作用。

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藥物的臨床療效一般通過療效觀測指標來記錄,而療效評價可以是某一療效觀測指標的直接測量結果,更多的是在直接測量結果基礎上轉化而來的、特定的評價指標來評價。同一療效觀測指標,可以轉化出多種療效評價指標,不同的療效評價指標在藥物有效性確證中的作用不同和地位不同,有的可以作為主要療效指標,有的則作為次要療效指標。如某一適應證的評價量表,以前后的減分值為主要療效指標,而以50%的減分率的患者比例為次要療效指標。而另一適應證的評價量表,以積分變化到某一積分值以下患者的比例為主要療效指標,而前后的減分值比較為次要療效指標。

我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用心肌保護劑組。其中正常對照組未經任何處理,模型對照組與服用心肌保護劑組都攝入了等量的鹽酸異丙腎上腺素(鹽酸異丙腎上腺素通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。服用心肌損傷保護劑組在攝入鹽酸異丙腎上腺素的同時攝入N-乙酰半胱氨酸之類的心肌保護劑。服用一段時間心肌保護劑后,我們對斑馬魚整體進行特異性熒光染色,觀察心肌細胞的凋亡情況。可以看到,服用心肌保護劑組的心臟情況與正常對照組比較相似,細胞凋亡明顯比模型對照組減少。斑馬魚模型評價促進組織再生傷口愈合功效。

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細胞色素P450酶是許多同工酶組成的超大家族,主要位于肝臟微粒體中,參與生物體許多內源性和外源性物質的生物轉化。許多臨床相關藥物間的相互作用與抑制和/或誘導CYP酶有關,改變CYP酶的活性對藥效有重要影響,有時甚至會威脅生命。在眾多肝臟細胞色素P450酶家族中,CYP3A4和CYP2D6與70%以上的藥物代謝有關,其中CYP3A4占50%以上,而CYP2D6占20%左右,因此目前藥物代謝研究集中于評價藥物對CYP3A4和CYP2D6的影響。我們評價斑馬魚對細胞色素P450的影響作用有2個指標:1.對CYP3A4的影響作用;2.對CYP2D6的影響作用。關于藥物功效的合理評價。藥效評價的生物模型

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貧血是指人體外周血紅細胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。溶血性貧血是由于紅細胞的破壞增速、增多,超過造血補償能力范圍時所發生的一種貧血。斑馬魚造血系統的形成,包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統,其相關的轉錄因子及信號轉導通路同人類有高度的同源性,這些特點使斑馬魚在人類造血系統和血液疾病的研究中有著更加大量的應用。研究表明,苯肼是一種溶血劑。苯肼作用于紅細胞膜,加速膜表面亮氨酸、賴氨酸及組氨酸的水解,使大量紅細胞迅速遭到破壞;同時可選擇性地氧化膜骨架和α珠蛋白,并將磷脂酰絲氨酸易位至紅細胞表面,導致紅細胞變形性降低,增強紅細胞黏附到細胞外基質的能力從而破壞循環血中的成熟紅細胞,使血紅蛋白變性聚集、形成Heinz小體,使得紅細胞的破壞速度遠大于機體紅細胞再造的能力,導致機體發生溶血性貧血。用鄰聯茴香胺染色法對紅細胞進行特異性染色(呈紅色),貧血斑馬魚心臟部位的紅細胞較正常斑馬魚明顯減少。由于斑馬魚早期出現血液循環時胚胎透明,在解剖顯微鏡下可以觀察到。藥物的安全性評估

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