注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。為什么PEI轉染試劑配制的過程中要加酸？核酸PEI轉染試劑價格多少

細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。2.制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養皿用420μL反應總體積為例。準備兩支1.5mL離心管，一管將質粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養基中，輕輕搖動平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3.培養6-10h后更換為37℃預熱的含有血清的培養基，繼續培養，16h左右可以觀測到報告基因的表達。高性價比PEI轉染試劑殘留檢測方法分子量為25000的線性PEI即Polysciences23966轉染效率比較高。

上海曼博生物醫藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體，生命科學領域一站式供應鏈體系，以及高風險生物危險材料進出口平臺的優勢，曼博生物嚴格篩選國際創新且經過同行驗證過的產品和技術 ，引入中國市場，開發、孵育和推廣，致力于將全球創新產品和前沿技術帶入中國，集中在為細胞/基因領域、/免疫，抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品，包括從Research grade到cGMP等級的無動物源培養基質，轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務，支持ATMP（Advance Therapy Medicinal Products）藥物研發從R&D到Clinical trial以及后期商業化的無縫轉化

抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品，包括從Research grade到cGMP等級的無動物源培養基質，轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務，支持ATMP（Advance Therapy Medicinal Products）藥物研發從R&D到Clinical trial以及后期商業化的無縫轉化；以及提供藥物開發和探索的抗體文庫定制和商業授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業化生產，以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術，分享研發工具進步帶來的技術紅利，終為細胞、基因產業以及再生醫學行業等乃至整個生命科學行業賦能！PEI轉染試劑的殘留檢測方法怎么開發？

轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。轉染24h后，將細胞傳代至新鮮的生長培養基中（將細胞稀釋10倍以上），在CO2培養箱中37℃孵育過一晚。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約1~2周可篩選到耐藥性克隆，在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養基。哪個品牌的PEI轉染試劑質量好？RNAPEI轉染試劑配置方法

Polysciences的PEI轉染試劑品質如何？核酸PEI轉染試劑價格多少

穩定轉染方法1.接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。核酸PEI轉染試劑價格多少

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