體外蛋白表達正在革新現場快速檢測技術。以瘧疾診斷為例：將凍干的大腸桿菌裂解物、瘧原蟲 HRP2 基因 DNA 及顯色底物預裝在微流控芯片中，加入水樣后啟動 30 分鐘體外蛋白表達反應，生成的 HRP2 蛋白催化顯色劑變紅，靈敏度達 5 寄生蟲/μL（傳統試紙只 200/μL）。此方案在剛果金野外測試中顯示，陽性檢出率提升 40% 且無需冷鏈運輸。類似技術已擴展至COVID-19檢測——用患者鼻拭子 RNA 直接合成 Spike 蛋白，結合納米金抗體實現 1 小時確診。這種 “即測即表達”模式 將診斷成本降至 $0.5/次，成為資源匱乏地區的抗疫利器。大腸桿菌裂解物的??高翻譯效率??可支持??100μg/mL級??蛋白產量,限制造就完整功能的真**白表達。桿狀病毒蛋白表達包涵體

1、從DNA到106μg純化蛋白的時間不到48小時

2、Biacore檢測證實VEGF165與貝伐珠單抗結合具有功能活性，親和力達36pM通過eProteinDiscovery系統進行快速無細胞蛋白表達與純化篩選，次日即可進行蛋白放大生產，這一組合縮短了獲取高質量蛋白以在Biacore系統上進行功能驗證的時間。

英國Nuclera公司由劍橋大學的博士生們于2013年創立。在撰寫論文期間，他們發現蛋白質難以獲取的問題是生物學領域的首要障礙和關鍵瓶頸。他們著手解決蛋白質難以獲取的問題，以期改善人類健康狀況。公司的愿景是打造出從DNA到蛋白質的原型設計系統，以減少在藥物發現計劃中獲得靶蛋白的時間和障礙。上海曼博生物是Nuclera品牌的官方代理商。如咨詢產品信息，歡迎咨詢！ 目的蛋白表達原理通過灌流式反應器將CHO細胞體外蛋白表達??周期縮短至72小時，單批次產量突破5g/L。

無細胞蛋白表達技術在快速響應公共衛生事件和jun shi應用中表現突出。例如，在COVID-19期間，無細胞蛋白表達技術被用于數小時內合成病毒抗原，加速疫苗候選物篩選。美國DARPA支持的“生物制造”項目利用凍干無細胞蛋白表達技術試劑，在戰場環境中按需生產止血蛋白或抗體，實現便攜式、無需冷鏈的即時生物制造。這類場景凸顯了無細胞蛋白表達技術在時效性和環境適應性上的不可替代性。根據應用需求，無細胞蛋白表達技術可整合非天然氨基酸（通過修飾tRNA）、脂質體（用于膜蛋白表達）或翻譯后修飾酶（如糖基化酶）。

無細胞蛋白表達的興起可將這一時間縮短至十幾個小時，但是仍需要現進行表達載體的制備，體外擴增和高通量蛋白表達然后再進行篩選等多步操作。Nuclera將這些復雜的流程ji he到eProteinDiscovery系統。該系統使用基于數字微流控的智能卡盒、蛋白質質量檢測和無細胞蛋白合成，使研究人員更容易快速獲取高質量蛋白質。只要將目標蛋白質的序列輸入配套軟件，就可以利用預設融合標簽定制DNA構建體以優化表達，然后將表達載體裝載到機器上，該系統就會通過自動化構建篩選（可同時篩24種DNA構建體x8種無細胞混合物=192種獨特表達條件），根據可溶性、可純化性和純化產量數據確定Zui 佳表達條件，然后放大規模并獲取蛋白質以供下游應用，從DNA到可用于分析檢測的蛋白質只需要48小時。系統已生產超過2,000種蛋白質，包含多種類型，其中約77%的人類蛋白。蛋白質類型包括伴侶蛋白、水解酶、連接酶、氧化還原酶、信號蛋白、結構蛋白和轉移酶等，分子量范圍為18kDa~300kDa(平均:46kDa)。獲得的難表達蛋白包括膜蛋白、含二硫鍵的蛋白和含高度無序結構的蛋白等，還更容易地篩選和獲取同源物、直系同源物、突變和異構體。體外蛋白表達技術使??致死性靶點研究成為可能??，為新藥開發提供關鍵依據。

在特殊應用領域，無細胞蛋白表達技術CFPS的性價比難以用傳統標準衡量。例如：① 非天然氨基酸標記蛋白（如ADC藥物開發），細胞系統需基因改造且產量極低，而無細胞蛋白表達技術CFPS直接添加修飾氨基酸即可實現，單次反應成本雖高但省去數月工程菌構建時間；② 便攜式生物制造（如戰場急救蛋白生產），凍干無細胞蛋白表達技術CFPS試劑可在無冷鏈條件下即時合成，其“按需生產”特性大幅降低倉儲物流成本。這些場景下，無細胞蛋白表達技術CFPS的技術獨特性使其成為高性價比解決方案。大腸桿菌體外蛋白表達??的成本只為兔網織紅細胞系統的1/20，適合大規模篩選。目的蛋白表達原理

??兔網織紅細胞裂解物??（RRL）和??小麥胚芽裂解物??（WGE）是兩類常見真核平臺,用于體外蛋白表達.桿狀病毒蛋白表達包涵體

體外蛋白表達系統的明顯缺陷在于 缺乏真核細胞器結構，導致關鍵翻譯后修飾難以實現：糖基化不完整性： 裂解物中缺乏高爾基體轉運機制，只能生成高甘露糖型等簡單糖鏈，無法合成復雜雙觸角N-糖；磷酸化/乙酰化失衡： 激酶/磷酸酶網絡不完整，使信號通路蛋白的修飾狀態與生理條件差異明顯；二硫鍵錯配風險： 氧化還原環境調控不足導致多二硫鍵蛋白錯誤折疊率升高。這些局限使體外蛋白表達在 zhi liao性抗體等需精確修飾的蛋白生產中應用受限。桿狀病毒蛋白表達包涵體