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支鏈PEI轉染試劑作用原理

來源: 發布時間:2025-08-14

產品簡介:KyforaBiobyPolysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為25000的線性PEI即KyforaBiobyPolysciences23966(PEI25K)轉染效率表現優良。產品特點:適用于生產mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV);在HEK293、CHO和Sf9細胞系中高度有效;適用于從研發到工業化生產的各個階段;可預測,可大規模生產;兩周內即可生成大量目標蛋白或病毒;高轉染效率;大量已發表的文獻支持。PEI轉染試劑不含動物源成分。支鏈PEI轉染試劑作用原理

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產品簡介:Transporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉染試劑)溶液,由PEIMAX配置而成,采用0.1umPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞,并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉染效率。適用于工藝開發、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業化生產。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲(SF9、SF21)等真核細胞系,可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,所以較大的質粒也可以成功地轉染。Transporter5可節省試劑準備時間,加快項目進度。經過嚴格的性能檢測,確保品質,在新藥研發過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產的轉染試劑。產品特點:非GMP,研究級PEI轉染試劑溶液;高轉染效率;無縫過渡到MAXgeneGMP;易放大,可預測產量;用于工藝開發,臨床前和早期臨床研究。請關注我們的公眾號:Mine-bio化學合成PEI轉染試劑作用原理PEI轉染試劑的主要分子量是多少呢?

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穩定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養基。若想咨詢更多關于PEI轉染試劑相關信息,歡迎咨詢上海曼博生物!

抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發從R&D到Clinicaltrial以及后期商業化的無縫轉化;以及提供藥物開發和探索的抗體文庫定制和商業授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業化生產,以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術,分享研發工具進步帶來的技術紅利,終為細胞、基因產業以及再生醫學行業等乃至整個生命科學行業賦能!更多關于PEI轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!哪個品牌的PEI轉染試劑性價比高?

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穩定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養基。近期還有PEIfree申請活動,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEI MAX ,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。國產PEI轉染試劑優化要素

PEI轉染試劑是不是可以保存在4度?支鏈PEI轉染試劑作用原理

注意事項質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內質粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。歡迎關注曼博生物公眾號:Mine-bio支鏈PEI轉染試劑作用原理

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