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海南FabULOUSIdeS蛋白酶

來源: 發布時間:2024-05-21

Genovis提供凍干和固定化的FabRICATOR(IdeS),為客戶提供了許多選擇,以滿足他們的需求。 凍干形式用于高度靈活的方法開發的目的,并隨時準備使用,只需重組和添加到IgG樣本。 凍干酶的靈活性也意味著它可以應用于更高的通量和自動化的工作流程。 Genovis還提供了在瓊脂糖樹脂上固定化的酶,在隨時可用的旋轉柱中,這可以極大限度地減少在樣品中殘留的酶,這可能是有利的。 對于更多的制備應用,我們提供FabRICATOR Fab2試劑盒,這是IgG片段生成和純化的強大工具。 這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱,用于亞基的親和純化。 由于FabRICATOR在非還原條件下是活性的,F(ab’)2片段保留其鏈間和鏈內二硫鍵,如果片段想用于結合研究,這一點尤為重要,因為結合效率和免疫反應性將被保留。在抗體藥及核酸藥領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶。海南FabULOUSIdeS蛋白酶

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對于涉及完整Fab或Fc抗體片段的應用,需要在抗體鉸鏈處進行消化。木瓜蛋白酶和 Lys-C 等傳統酶可用于生成 Fab 片段,但非特異性酶活性需要仔細優化,以極大限度地降低多個消化位點的風險。Genovis的SmartEnzymes IgG 蛋白酶 GingisKHAN 和 FabALACTICA 具有一個消化位點,可從人 IgG1 生成均質的 Fab 和 Fc 抗體片段。生成的片段可用于結晶和高階結構 (HOS) 的 NMR 研究、結合研究等。在這里,我們提出了獲得完整Fab和Fc抗體片段的不同策略。所得片段顯示 GingisKHAN 的有效消化,用于生成完整的 Fab 片段或從依那西普上的融合 TNFR 結構域中分離 Fc。由于 GingisKHAN 的特異性消化依賴于 IgG 的天然折疊,因此在變性條件下特異性受到負面影響。為了使用SDS-PAGE分析消解效率,在加入SDS上樣緩沖液之前,停止在分析樣品中加入碘乙酰胺的反應。Genovis同時提供IdeS酶的純化試劑盒。江西GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶用 Genovis的GlySERIAS Immobilized消化雙特異性 T 細胞接合器(BiTE)分子。

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經過多年的經驗積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細胞、細胞基因藥物等領域的需求。其中,細胞基因藥物領域產品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產品、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、聚糖分析用酶、ADC偶聯技術、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。

Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對其他物種的 IgG 也有活性,包括來自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,FabRICATOR的高特異性在某些情況下會使其對鉸鏈區域的突變敏感,并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,與 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對于這種抗體種類,FabULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。人IgA1比IgA2具有更長的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區域。

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當你應用像肽圖這樣的方法時,你可以從Genovis中級方法中獲得的信息量就沒有那么多了。一個主要的區別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個氨基酸。然而,中級分析比肽圖譜具有快速和簡單的巨大優勢,因為需要分析的色譜峰要少得多,數據處理任務要簡單得多。此外,在中級實驗中,手工實驗步驟要少得多,FabALACTICA(IdeS)酶切消化方法不需要針對不同的人體IgG1進行優化。一旦在氨基酸水平上進行了PTM表征,我們非常認為中級表征肽圖的一種補充方法,可以在更常規的基礎上應用。中級分析更適用于高通量或監測類型的方法,并可用于支持肽圖分析。可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的 F(ab')2 和 Fc 片段。廣東FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

Genovis已經測試了 PBS 和 150 mM 醋酸銨,并且也適用于FabRICATOR HPLC。海南FabULOUSIdeS蛋白酶

與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時內完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發揮活性。活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。海南FabULOUSIdeS蛋白酶

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