在免疫學(xué)和學(xué)研究,常需同時監(jiān)測多個細胞因子或信號蛋白的磷酸化狀態(tài)。基于微珠的多重均相發(fā)光檢測系統(tǒng)(如Luminex xMAP技術(shù)結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測)應(yīng)運而生。該系統(tǒng)使用不同顏色編碼的微球作為固相載體,每種微球包被一種特異性捕獲抗體。樣本中的多種靶標被各自捕獲后,再用生物素化檢測抗體和鏈霉親和素-熒光/發(fā)光報告分子進行檢測。雖然微球是固相,但整個反應(yīng)在懸浮液中進行,讀數(shù)前無需洗滌,本質(zhì)上也是一種高效的“液相”或“懸浮芯片”式多重均相檢測。告別繁瑣操作,均相化學(xué)發(fā)光來了!河南浦光生物均相發(fā)光優(yōu)點

評估疫苗免疫效果或康復(fù)者血清中和能力的關(guān)鍵是病毒中和抗體檢測。傳統(tǒng)的空斑減少中和試驗(PRNT)耗時費力。基于假病毒系統(tǒng)的均相發(fā)光中和試驗已成為高通量替代方案。將表達熒光素酶的報告基因包裝進假病毒顆粒(攜帶目標病毒的囊膜蛋白)。當假病毒炎癥細胞時,會驅(qū)動熒光素酶表達。如果樣本中存在中和抗體,則會阻斷炎癥,導(dǎo)致熒光素酶信號下降。檢測時只需在炎癥后裂解細胞并加入發(fā)光底物,即可實現(xiàn)快速、定量、高通量的中和抗體滴度測定,在COVID-19等疫病中發(fā)揮了重要作用。上海技術(shù)升級均相發(fā)光均相發(fā)光技術(shù)研究進展,浦光生物為您提供前沿資訊!

均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)因其超高的通量、靈敏度和易于自動化的特性,已成為現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)高通量篩選(HTS)的支柱技術(shù)。在靶點導(dǎo)向的篩選中,它廣泛應(yīng)用于:激酶/磷酸酶抑制劑篩選(通過檢測磷酸化底物的量)、GPCR功能分析(檢測cAMP、IP3或β-arrestin招募)、核受體轉(zhuǎn)錄活性篩選(報告基因檢測)、蛋白-蛋白相互作用抑制劑篩選(如使用Alpha技術(shù))、以及酶活性分析(蛋白酶、去乙酰化酶等)。其“混合-讀數(shù)”的模式允許在1536孔甚至更高密度板中進行超大規(guī)模化合物庫(數(shù)十萬至上百萬)的篩選,每天可產(chǎn)生海量數(shù)據(jù),極大加速了先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)進程。
表面等離子體共振(SPR)是一種實時、無標記的生物分子相互作用分析技術(shù),能提供結(jié)合動力學(xué)(kon, koff)和親和力(KD)的精確數(shù)據(jù)。均相發(fā)光技術(shù)(如TR-FRET, Alpha)則是一種基于標記的高通量終點法或?qū)崟r動力學(xué)檢測。兩者具有很好的互補性:SPR常用于前期的靶點-配體相互作用的詳細表征和驗證;而基于此驗證過的相互作用對,開發(fā)出的均相發(fā)光檢測方法,則可以用于后續(xù)的大規(guī)模化合物庫篩選和功能學(xué)研究。將兩者結(jié)合,構(gòu)成了從機理研究到大規(guī)模篩選的完整工作流程。均相化學(xué)發(fā)光在自身免疫性疾病診斷中的作用大嗎?

適配體是通過體外篩選得到的單鏈DNA/RNA分子,能特異性結(jié)合小分子、蛋白質(zhì)甚至細胞。將適配體的高特異性與均相化學(xué)發(fā)光的高靈敏度結(jié)合,催生了新型生物傳感器。設(shè)計策略包括:構(gòu)象開關(guān)型:適配體與化學(xué)發(fā)光標記物(如吖啶酯)和淬滅基團相連,結(jié)合靶標后構(gòu)象變化,改變發(fā)光效率。分裂型:將化學(xué)發(fā)光酶或催化其反應(yīng)的組分分割,分別與分裂的適配體序列連接,靶標存在時適配體重組,恢復(fù)發(fā)光活性。鄰近連接型:兩個適配體分別結(jié)合靶標的不同部位,拉近其攜帶的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)組分(如供體/受體珠),觸發(fā)信號。這些傳感器在環(huán)境監(jiān)測、食品安全和生物標志物檢測中潛力巨大。均相化學(xué)發(fā)光與熒光免疫技術(shù)相比,優(yōu)勢在哪?黑龍江CRET技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)
均相化學(xué)發(fā)光在個性化醫(yī)療中的應(yīng)用潛力有多大?河南浦光生物均相發(fā)光優(yōu)點
均相發(fā)光技術(shù)正逐步應(yīng)用于食品安全和環(huán)境監(jiān)測等多應(yīng)用領(lǐng)域。例如,檢測食品中的毒(如黃曲霉素)、抵抗細菌藥物殘留或病原菌等。通過設(shè)計針對這些污染物的抗體或適配體,并將其與均相化學(xué)發(fā)光信號系統(tǒng)偶聯(lián),就可以開發(fā)出快速、高通量的篩查方法。相較于傳統(tǒng)的色譜或微生物學(xué)方法,均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)具有檢測更快捷,適合大批量樣本的初篩的特點。在環(huán)境監(jiān)測中,常常可用于檢測水中的重金屬離子、有機污染物等,具有現(xiàn)場快速分析的潛力。河南浦光生物均相發(fā)光優(yōu)點