微波爐中融化后制成1％的瓊脂糖膠。取10μlpcr產(chǎn)物于加樣孔中，120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統(tǒng)成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結(jié)果，wt表示野生型對(duì)照，條帶大小為223bp；het表示雜合子，有兩個(gè)條帶223bp和358bp；sixko表示純合子，條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3－cre鑒定結(jié)果。six3－cre大小為200bp。根據(jù)圖4中a的結(jié)果，顯示所采用的鑒定方法可對(duì)新生小鼠的基因型進(jìn)行有效鑒定。其中，gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子)，并進(jìn)行相關(guān)表型的驗(yàn)證。(5)rt-pcr實(shí)驗(yàn)分析six3-cre敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率驗(yàn)證，方法如下：(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網(wǎng)膜組織，置于，加入1mltrizol提取液，室溫20分鐘；(b)加入200μl氯仿，充分混勻，室溫靜置10分鐘；(c)將樣品置于4度離心機(jī)，10000轉(zhuǎn)離心15分鐘；(d)小心吸取上清液，加入等體積異丙醇，充分混勻，10000轉(zhuǎn)離心沉淀rna；(e)75％乙醇清洗析出的總rna，離心再次沉淀，然后晾干加入depc水溶解；(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。SD大鼠腦缺血模型建立。北京高脂高糖動(dòng)物模型服務(wù)

基因/蛋白質(zhì)表達(dá)定性或定量檢測(cè)在進(jìn)行分子檢測(cè)的過(guò)程中，保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關(guān)重要，因此在取樣過(guò)程中，應(yīng)盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過(guò)程，將會(huì)導(dǎo)致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無(wú)差別降解，嚴(yán)重影響后續(xù)分子檢測(cè)結(jié)果。在條件允許的情況下，組織樣本在離體后應(yīng)立刻裝入凍存管內(nèi)，并立即放入液氮中進(jìn)行冷凍。在RNA提取樣本的保存過(guò)程中，可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進(jìn)行RNA酶的抑制。針對(duì)蛋白質(zhì)提取樣本的保存，我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進(jìn)行短期處理。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）及免疫印跡（Westernblotting，WB），這兩種實(shí)驗(yàn)手段是分子生物學(xué)檢測(cè)中不可或缺的一部分，也是發(fā)表論文至關(guān)重要的分子檢測(cè)數(shù)據(jù)。PCR主要用來(lái)對(duì)基因在基因組層面或轉(zhuǎn)錄層面的變化進(jìn)行定性或定量檢測(cè)，而WB則主要用來(lái)對(duì)某一蛋白質(zhì)的表達(dá)進(jìn)行定量檢測(cè)。（4）轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及代謝組學(xué)檢測(cè)隨著檢測(cè)水平及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，各類組學(xué)檢測(cè)的價(jià)格降低，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中也常常運(yùn)用組學(xué)檢測(cè)來(lái)提升實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的檔次。在我們進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白質(zhì)組學(xué)的檢測(cè)過(guò)程中，同樣是要首先確保目標(biāo)RNA或蛋白質(zhì)的片段完整性。上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型服務(wù)用血管內(nèi)線栓阻斷法制備大鼠 MCAO模型。已被腦血管病研究者接受和采用。

疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動(dòng)物抗抑郁對(duì)腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用（樣品篩選、IC50測(cè)定）大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)（大/小鼠，Noduls軟件、視屏分析）大/小鼠小鼠懸尾試驗(yàn)（Noduls軟件、視屏分析）小鼠5-羥色胺增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗(yàn)小鼠育亨賓毒性增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性刺激（CUMS）模型大鼠新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測(cè)定小鼠對(duì)新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用（谷氨酸損傷、過(guò)氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等）新生大鼠對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細(xì)胞抗驚厥育亨賓毒性增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對(duì)巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗(yàn)小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（大/小鼠，全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大/小鼠大鼠高架十字迷宮法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠大鼠穿梭箱法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型（雙側(cè)損毀PD模型）大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。

中風(fēng)模型）股動(dòng)脈內(nèi)皮損傷模型頸動(dòng)脈結(jié)扎或部分結(jié)扎術(shù)深靜脈血栓模型下肢缺血模型門腔靜脈分流術(shù)左、右心血流動(dòng)力學(xué)測(cè)試左心系統(tǒng)測(cè)壓右心系統(tǒng)測(cè)壓腹部手術(shù)膽管結(jié)扎術(shù)胃大部切除術(shù)小腸部分切除術(shù)急性腎衰模型單側(cè)腎切除術(shù)3/4腎切除術(shù)5/6腎切除術(shù)脾切除術(shù)腎上腺切除術(shù)腎上腺髓質(zhì)摘除術(shù)骨關(guān)節(jié)炎模型脾神經(jīng)切除術(shù)肝臟迷走神經(jīng)切斷術(shù)胃迷走神經(jīng)切斷術(shù)膈下迷走神經(jīng)切斷術(shù)去勢(shì)術(shù)輸精管結(jié)扎術(shù)卵巢切除術(shù)單側(cè)或雙側(cè)輸卵管結(jié)扎術(shù)子宮切除術(shù)輸尿管結(jié)扎術(shù)神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)單側(cè)腦內(nèi)定位插管雙側(cè)腦內(nèi)定位插管側(cè)腦室導(dǎo)管側(cè)腦室微量滲透泵導(dǎo)管第3腦室插管腓腸肌神經(jīng)切除術(shù)軟組織手術(shù)甲狀腺切除術(shù)甲狀旁腺切除術(shù)甲狀腺切除術(shù)伴甲狀旁腺再植入術(shù)胸腺切除術(shù)松果體切除術(shù)垂體切除術(shù)傳感器植入手術(shù)血壓遙測(cè)左心室壓遙測(cè)門靜脈壓遙測(cè)血壓與心電圖遙測(cè)血壓與腦電圖遙測(cè)胸內(nèi)壓遙測(cè)胸內(nèi)壓與心電圖遙測(cè)心電圖遙測(cè)腦電圖遙測(cè)肌電遙測(cè)心電圖與腦電圖遙測(cè)腦電圖與肌電遙測(cè)血糖遙測(cè)體溫與活動(dòng)度遙測(cè)血管導(dǎo)管手術(shù)頸動(dòng)脈導(dǎo)管顱內(nèi)給藥頸動(dòng)脈導(dǎo)管腹主動(dòng)脈導(dǎo)管股動(dòng)脈導(dǎo)管股靜脈導(dǎo)管單側(cè)頸靜脈導(dǎo)管雙側(cè)頸靜脈導(dǎo)管門靜脈導(dǎo)管下腔靜脈導(dǎo)管非血管導(dǎo)管手術(shù)膽管導(dǎo)管胃導(dǎo)管十二指腸導(dǎo)管空腸導(dǎo)管回腸導(dǎo)管盲腸導(dǎo)管結(jié)腸導(dǎo)管膀。APOE-/-鼠左頸動(dòng)脈結(jié)扎糖尿病模型。

IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型，并觀察模型的生化及病理指標(biāo)特點(diǎn)。【材料】1、酸化水：鹽酸調(diào)滅菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，滅菌水配制；【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導(dǎo)法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持續(xù)8周；2、同時(shí)皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持續(xù)8周；3、分別于第6、8周以（）尾靜脈注射LPS，1次/周；4、每?jī)芍苋?4h尿液一次觀察尿蛋白及紅細(xì)胞；5、每日觀察精神、飲食、大小便，第9周處死，取血和腎、肝做相應(yīng)檢查；6、取尿液后2000r/min離心10min，取上清用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)尿蛋白肌酐比值，鏡下觀察尿沉渣中有無(wú)紅細(xì)胞。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分，其毒副作用之一是引起肺纖維化。兔動(dòng)物模型服務(wù)

可以克服人類某些疾病潛伏期長(zhǎng)，病程長(zhǎng)和發(fā)病率低的缺點(diǎn)。北京高脂高糖動(dòng)物模型服務(wù)

導(dǎo)師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細(xì)記好實(shí)驗(yàn)記錄，只要是和實(shí)驗(yàn)相關(guān)的，無(wú)論是照片，還是文字，必須要及時(shí)事無(wú)巨細(xì)地詳細(xì)記錄。并且要備份好每一份實(shí)驗(yàn)記錄。我個(gè)人一般喜歡每天及時(shí)地記在「科研實(shí)驗(yàn)記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲(chǔ)存在電腦和云端。時(shí)間規(guī)劃首先，個(gè)人是不贊同每天24小時(shí)泡在實(shí)驗(yàn)室的，高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項(xiàng)的格式逐條列出，哪一個(gè)時(shí)間段需要做什么事情？這樣的好處有兩點(diǎn)，一個(gè)是自己提前把時(shí)間預(yù)約好，可以留出足夠的時(shí)間休息和娛樂(lè)；另一個(gè)是在執(zhí)行計(jì)劃的時(shí)候往往會(huì)有一種時(shí)間緊迫感，辦事起來(lái)往往更高效且不會(huì)遺漏。總之，預(yù)實(shí)驗(yàn)就是迷你版正式實(shí)驗(yàn)，希望小伙伴們?cè)谶M(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候一定要盡可能地準(zhǔn)備周全，這樣才能快的推進(jìn)正式實(shí)驗(yàn)。北京高脂高糖動(dòng)物模型服務(wù)