熒光定量PCR儀的熔解曲線分析功能可驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物特異性,有效區(qū)分非特異性產(chǎn)物。其原理是在PCR反應(yīng)結(jié)束后,逐步升高反應(yīng)溫度,監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)隨溫度的變化。特異性擴(kuò)增產(chǎn)物具有特定的熔解溫度(Tm值),而非特異性產(chǎn)物(如引物二聚體)的Tm值較低。通過(guò)分析熔解曲線,可判斷擴(kuò)增產(chǎn)物是否為單一特異性產(chǎn)物。例如,在基因突變檢測(cè)中,熔解曲線分析可識(shí)別單堿基突變,通過(guò)Tm值差異區(qū)分野生型和突變型基因。某研究利用該技術(shù)檢測(cè)肺相關(guān)基因突變,發(fā)現(xiàn)某突變位點(diǎn)的Tm值與野生型差異明顯,為個(gè)體化提供了科學(xué)依據(jù)。此外,熔解曲線分析無(wú)需開(kāi)蓋操作,避免了氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn),提升了實(shí)驗(yàn)安全性。純度差,含有蛋白質(zhì)、多糖、酚類等雜質(zhì),會(huì)抑制 PCR 反應(yīng),降低擴(kuò)增效率,影響熒光信號(hào)強(qiáng)度。泰州定量熒光定量PCR儀經(jīng)銷商

Cy5.5 熒光定量 PCR 儀通過(guò)優(yōu)化光學(xué)系統(tǒng)和反應(yīng)體系,將檢測(cè)限降至 10 拷貝 /μL,其重要技術(shù)包括高數(shù)值孔徑(NA=0.8)的物鏡設(shè)計(jì)、低噪聲的制冷 CCD 檢測(cè)器(-20℃)以及高特異性的熱啟動(dòng) Taq 酶(酶活性抑制率 > 99% at 4℃)。在臨床體液樣本(如腦脊液、胸腹水)中微量病原體核酸檢測(cè)中,該儀器可有效檢測(cè)出低濃度的病毒或細(xì)菌核酸,例如在結(jié)核分枝桿菌(MTB)檢測(cè)中,傳統(tǒng) PCR 儀需靶標(biāo)濃度 > 100 拷貝 /μL 才能檢出,而該儀器可檢測(cè)到 10 拷貝 /μL 的 MTB 核酸,顯著提高了結(jié)核病的早期診斷率。此外,該儀器搭配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有莖環(huán)結(jié)構(gòu),可進(jìn)一步提高探針與靶標(biāo)結(jié)合的特異性,減少非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果。臨床數(shù)據(jù)顯示,該儀器在體液樣本病原體檢測(cè)中的陽(yáng)性檢出率比傳統(tǒng)方法提升 20% 以上,且特異性保持在 98% 以上。常州SYBR-Green熒光定量PCR儀型號(hào)而熒光定量 PCR 技術(shù)可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)得出結(jié)果,提高了診斷效率。

TET 熒光定量 PCR 儀針對(duì)基因組 DNA 甲基化檢測(cè)的特殊性,開(kāi)發(fā)了支持 TET 標(biāo)記甲基化特異性探針的檢測(cè)系統(tǒng),其重要原理是通過(guò)亞硫酸氫鹽處理將未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U),而甲基化的 C 保持不變,再利用 TET 標(biāo)記的特異性探針(結(jié)合甲基化 C 位點(diǎn))檢測(cè)靶標(biāo)區(qū)域。該儀器通過(guò)熒光信號(hào)差值分析(處理后樣本與未處理樣本的熒光信號(hào)差),可精細(xì)量化甲基化水平(0-100%),解決了傳統(tǒng)甲基化檢測(cè)中定性或半定量的局限性。在表觀遺傳學(xué)研究中,例如乳腺中 BRCA1 基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化檢測(cè),該儀器可檢測(cè)到低至 5% 的甲基化水平變化,為發(fā)生機(jī)制研究提供精細(xì)數(shù)據(jù)。此外,該儀器配套的甲基化分析軟件可自動(dòng)計(jì)算甲基化率,并生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控報(bào)告,簡(jiǎn)化了數(shù)據(jù)分析流程,同時(shí)支持與臨床樣本信息系統(tǒng)對(duì)接,實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的自動(dòng)化管理和追溯。
Texas Red 熒光定量 PCR 儀的特征發(fā)射波長(zhǎng)(585-605nm)與常用 FAM 染料(518nm)的發(fā)射波長(zhǎng)間隔明顯,可有效避免熒光串?dāng)_,實(shí)現(xiàn)雙重?zé)晒鈾z測(cè)。該儀器通過(guò)的光學(xué)濾波系統(tǒng),分別采集兩種染料的熒光信號(hào),無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的熒光補(bǔ)償校正,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。在病原體共檢場(chǎng)景中,例如流感病毒 A/B 型聯(lián)合檢測(cè),可將 FAM 標(biāo)記流感 A 病毒探針、Texas Red 標(biāo)記流感 B 病毒探針加入同一反應(yīng)體系,通過(guò)該儀器一次檢測(cè)即可同時(shí)區(qū)分兩種病毒,相比傳統(tǒng)單通道 PCR 儀需分兩次檢測(cè)的方式,檢測(cè)效率提升 50% 以上,且節(jié)省了樣本用量(需 2μL 核酸模板)。此外,Texas Red 染料的光穩(wěn)定性優(yōu)于同類橙光染料(如 HEX),在 30 次循環(huán)的熒光采集過(guò)程中,信號(hào)衰減率低于 5%,確保檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性(CV 值 < 3%)。若核酸發(fā)生降解,會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增片段不完整,影響定量準(zhǔn)確性,降低檢測(cè)靈敏度。

HEX 熒光定量 PCR 儀是針對(duì) HEX 熒光染料優(yōu)化的設(shè)備,其光學(xué)系統(tǒng)精細(xì)匹配 HEX 染料的激發(fā)波長(zhǎng)(535nm)與發(fā)射波長(zhǎng)(556nm),可高效捕獲特異性熒光信號(hào)。HEX 染料屬于熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)染料,常用于多重 PCR 反應(yīng)中的輔助檢測(cè)通道,與 FAM、VIC 等染料的發(fā)射光譜無(wú)重疊,可實(shí)現(xiàn)多靶標(biāo)同時(shí)檢測(cè)。該設(shè)備的重要優(yōu)勢(shì)在于信號(hào)區(qū)分度高,通過(guò)光學(xué)濾鏡的精細(xì)篩選,避免不同染料間的熒光串?dāng)_,確保每個(gè)靶標(biāo)的信號(hào)采集。在應(yīng)用場(chǎng)景中,常與其他通道聯(lián)合使用:例如在呼吸道病原體篩查中,F(xiàn)AM 通道檢測(cè),HEX 通道檢測(cè)流感病毒,可同時(shí)明確兩種病原體狀態(tài);在遺傳病檢測(cè)中,可同時(shí)檢測(cè)致病基因與內(nèi)控基因,提升檢測(cè)可靠性。其多重檢測(cè)能力大幅降低實(shí)驗(yàn)成本與時(shí)間,適用于大規(guī)模篩查與多靶標(biāo)聯(lián)合診斷場(chǎng)景。TET 熒光染料本身具有良好的熒光特性,其與核酸結(jié)合后能夠產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光信號(hào)。南通FAM熒光定量PCR儀品牌
Texas Red 熒光定量 PCR 儀發(fā)射波長(zhǎng) 585-605nm,可與 FAM 等染料實(shí)現(xiàn)雙重?zé)晒鈾z測(cè),提升病原體共檢效率。泰州定量熒光定量PCR儀經(jīng)銷商
熒光定量PCR儀的定量功能通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法,可精確測(cè)定樣本中目標(biāo)核酸的拷貝數(shù)。其原理是利用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,將樣本的Ct值代入曲線方程,計(jì)算樣本中目標(biāo)核酸的初始濃度。在病毒載量檢測(cè)中,定量功能可準(zhǔn)確測(cè)定病毒拷貝數(shù),為疾病診斷和監(jiān)測(cè)提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。例如,某研究利用該技術(shù)檢測(cè)HIV者血漿中的病毒載量,發(fā)現(xiàn)病毒載量與疾病進(jìn)展明顯相關(guān),為抗病毒方案的調(diào)整提供了科學(xué)依據(jù)。此外,定量功能還可用于轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)、微生物群落定量等領(lǐng)域,通過(guò)精確測(cè)定目標(biāo)核酸的拷貝數(shù),為相關(guān)研究提供量化數(shù)據(jù)支持。泰州定量熒光定量PCR儀經(jīng)銷商