均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)的實(shí)現(xiàn),主要依賴于兩種設(shè)計(jì)哲學(xué)。第一種是直接能量轉(zhuǎn)移路徑,表示技術(shù)為AlphaLISA/AlphaScreen。其關(guān)鍵是使用能產(chǎn)生單線態(tài)氧的供體微珠和含有化學(xué)發(fā)光劑的受體微珠。只有當(dāng)生物識(shí)別事件將兩者拉近至200納米以內(nèi)時(shí),供體產(chǎn)生的單線態(tài)氧才能有效觸發(fā)受體珠內(nèi)的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。未結(jié)合的微珠因距離過遠(yuǎn),單線態(tài)氧在擴(kuò)散途中淬滅,不產(chǎn)生信號(hào)。第二種是活性調(diào)控路徑,即生物識(shí)別事件直接調(diào)控化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的效率或速率。例如,將化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的催化劑(如酶)或其抑制劑/共反應(yīng)物與生物分子偶聯(lián),當(dāng)目標(biāo)分子存在導(dǎo)致它們接近或分離時(shí),化學(xué)發(fā)光信號(hào)被開啟或關(guān)閉。這兩種路徑均巧妙地利用“臨近”或“調(diào)控”將特異性識(shí)別與信號(hào)產(chǎn)生直接耦合。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)的原理是什么,如何實(shí)現(xiàn)檢測?浙江均相發(fā)光免疫分析

組蛋白修飾酶(如甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基酶、乙酰轉(zhuǎn)移酶、去乙酰化酶)是**、神經(jīng)疾病等領(lǐng)域的熱門靶點(diǎn)。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)為這些酶活性的檢測和抑制劑篩選建立了成熟平臺(tái)。以組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶為例,通常使用生物素標(biāo)記的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)類似物作為甲基供體。酶反應(yīng)后,生物素標(biāo)記的甲基被轉(zhuǎn)移到組蛋白底物上。然后,使用針對(duì)甲基化位點(diǎn)的抗體(偶聯(lián)供體珠)和鏈霉親和素(偶聯(lián)受體珠)通過Alpha技術(shù)檢測,信號(hào)強(qiáng)度與酶活性成正比。這種方法靈敏度高,抗干擾能力強(qiáng),可直接在含有化合物和輔因子的混合體系中進(jìn)行篩選。江西均相化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光浦光生物均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)在免疫檢測中的應(yīng)用有哪些創(chuàng)新點(diǎn)?

熱遷移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一種研究靶點(diǎn)與藥物在細(xì)胞水平結(jié)合情況的技術(shù)。其原理是藥物結(jié)合會(huì)改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質(zhì)印跡法檢測,通量低。現(xiàn)在,通過與均相發(fā)光免疫檢測(如Alpha)結(jié)合,開發(fā)出了均相CETSA(簡稱CETSA® HT)。該方法將細(xì)胞在不同溫度下加熱后裂解,使用針對(duì)目標(biāo)蛋白的抗體對(duì)(偶聯(lián)Alpha供體/受體珠)檢測溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通過比較藥物處理組與對(duì)照組的蛋白熱穩(wěn)定性曲線偏移,即可高通量地確認(rèn)化合物是否與細(xì)胞內(nèi)靶點(diǎn)結(jié)合,并評(píng)估結(jié)合強(qiáng)度。
在藥物安全性評(píng)價(jià)早期,評(píng)估化合物的遺傳毒性至關(guān)重要。傳統(tǒng)的細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)(Ames試驗(yàn))周期較長。一些基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的均相化學(xué)發(fā)光遺傳毒性篩選方法被開發(fā)出來。例如,使用工程細(xì)胞系,其中DNA損傷響應(yīng)元件(如p53響應(yīng)元件)調(diào)控著熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)。當(dāng)化合物引起DNA損傷時(shí),會(huì)活化報(bào)告基因,產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)。這類方法能在幾天內(nèi)完成對(duì)大量化合物的初步遺傳毒性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,作為Ames試驗(yàn)的高通量預(yù)篩選工具,有助于早期淘汰有風(fēng)險(xiǎn)的候選分子,節(jié)約研發(fā)成本。體外診斷行業(yè)新星,均相化學(xué)發(fā)光,助力企業(yè)快速發(fā)展!

在臨床診斷和生物研究中,經(jīng)常需要同時(shí)檢測一個(gè)樣本中的多個(gè)指標(biāo)。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實(shí)現(xiàn)多重分析。空間編碼:在不同的微孔或區(qū)域進(jìn)行不同檢測。光譜編碼:使用發(fā)射不同波長熒光的多種受體(如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體),通過檢測不同波長通道的信號(hào)來區(qū)分不同靶標(biāo)。時(shí)間編碼:利用具有不同熒光壽命的供體。Alpha技術(shù)中也可以使用發(fā)射不同波長熒光的受體珠。這些多重均相檢測方案能夠在單次反應(yīng)中獲取更多信息,節(jié)省樣本和試劑,提高檢測效率。體外診斷新機(jī)遇!均相發(fā)光新產(chǎn)品,助您搶占先機(jī)!河南干式化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光生產(chǎn)廠家
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均相發(fā)光技術(shù)正逐步應(yīng)用于食品安全和環(huán)境監(jiān)測等多應(yīng)用領(lǐng)域。例如,檢測食品中的毒(如黃曲霉素)、抵抗細(xì)菌藥物殘留或病原菌等。通過設(shè)計(jì)針對(duì)這些污染物的抗體或適配體,并將其與均相化學(xué)發(fā)光信號(hào)系統(tǒng)偶聯(lián),就可以開發(fā)出快速、高通量的篩查方法。相較于傳統(tǒng)的色譜或微生物學(xué)方法,均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)具有檢測更快捷,適合大批量樣本的初篩的特點(diǎn)。在環(huán)境監(jiān)測中,常常可用于檢測水中的重金屬離子、有機(jī)污染物等,具有現(xiàn)場快速分析的潛力。浙江均相發(fā)光免疫分析