熱遷移分析（Cellular Thermal Shift Assay， CETSA）是一種研究靶點與藥物在細胞水平結(jié)合情況的技術(shù)。其原理是藥物結(jié)合會改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質(zhì)印跡法檢測，通量低。現(xiàn)在，通過與均相發(fā)光免疫檢測（如Alpha）結(jié)合，開發(fā)出了均相CETSA（簡稱CETSA® HT）。該方法將細胞在不同溫度下加熱后裂解，使用針對目標蛋白的抗體對（偶聯(lián)Alpha供體/受體珠）檢測溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通過比較藥物處理組與對照組的蛋白熱穩(wěn)定性曲線偏移，即可高通量地確認化合物是否與細胞內(nèi)靶點結(jié)合，并評估結(jié)合強度。創(chuàng)新驅(qū)動未來！均相化學(xué)發(fā)光創(chuàng)新產(chǎn)品引導(dǎo)體外診斷新潮流！山西浦光生物均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別

熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）是均相發(fā)光技術(shù)中應(yīng)用比較多方面的信號產(chǎn)生機制之一。其原理是：當一個熒光基團（供體，Donor）的發(fā)射光譜與另一個熒光基團或淬滅基團（受體，Acceptor）的吸收光譜有足夠重疊，且兩者距離非常接近（通常1-10納米）時，供體的激發(fā)態(tài)能量會以非輻射方式轉(zhuǎn)移給受體。在均相檢測中，常將供體和受體分別標記在相互作用的生物分子對（如一對抗體、或酶與底物肽）上。當目標分子存在并促使這對生物分子結(jié)合時，供體與受體被拉近，發(fā)生有效的FRET，導(dǎo)致供體熒光淬滅，受體熒光增強（如果受體是熒光團）。通過監(jiān)測供體與受體熒光強度的比率變化，即可高靈敏度、高特異性地定量目標分析物。遼寧CRET技術(shù)均相發(fā)光生產(chǎn)廠家25-羥基維生素D（25 OH-VD）檢測試劑盒（均相化學(xué)發(fā)光法)。

均相發(fā)光技術(shù)也普遍用于細胞水平的分析，如細胞活力、凋亡和化合物毒性篩選。例如，基于ATP含量的細胞活力檢測：活細胞含有豐富的ATP，細胞裂解后釋放的ATP可與熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，發(fā)光強度與活細胞數(shù)量成正比。整個過程在同一個孔中加入裂解/檢測試劑即可完成，是均相操作的典范。對于細胞凋亡，可通過檢測caspase酶活性（使用熒光底物或發(fā)光底物）來實現(xiàn)均相分析。細胞毒性檢測則可測量因細胞膜損傷而釋放的胞內(nèi)酶（如乳酸脫氫酶LDH）活性，通過偶聯(lián)的發(fā)光反應(yīng)來定量。這些方法實現(xiàn)了對細胞狀態(tài)的快速、高通量、自動化評估。

外泌體等細胞外囊泡（EVs）是疾病診斷的潛在生物標志物來源。其分離和表征通常繁瑣。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)提供了快速分析方案。利用EVs表面普遍或特異性表達的膜蛋白（如CD9、CD63、CD81或相關(guān)抗原），將針對不同蛋白的抗體分別偶聯(lián)Alpha供體珠和受體珠。當EVs存在時，多個抗體結(jié)合到同一個EV上，拉近微珠產(chǎn)光信號，從而實現(xiàn)EVs的定量。通過使用不同抗體組合，還可以對EVs進行亞群分型分析。這種方法無需超速離心，操作簡單，有望用于臨床樣本的快速篩查。均相化學(xué)發(fā)光的信號放大機制是怎樣的？

在分子診斷領(lǐng)域，均相發(fā)光技術(shù)的應(yīng)用遠不止于基礎(chǔ)的實時熒光定量PCR（qPCR）。它正推動該領(lǐng)域向著更高靈敏度、更強特異性和更便捷的操作模式演進。例如，在數(shù)字PCR（dPCR）這一定量技術(shù)中，雖然目前主流依賴熒光檢測，但基于化學(xué)發(fā)光的均相檢測方案正在探索中。其設(shè)想是將PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個微滴后，利用化學(xué)發(fā)光探針（如基于魯米諾或吖啶酯的體系）進行檢測：在擴增陽性微滴中，探針被切割或構(gòu)象改變觸發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，通過計數(shù)發(fā)光的微滴數(shù)目即可實現(xiàn)核酸分子的定量。這種方法可能免除對復(fù)雜激發(fā)光學(xué)系統(tǒng)的依賴，并有望利用某些化學(xué)發(fā)光體系更高的信噪比特性，進一步提升對極低豐度靶標的檢出能力。專注體外診斷，均相化學(xué)發(fā)光凍干試劑，品質(zhì)值得信賴！安徽干式化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光免疫診斷試劑

均相化學(xué)發(fā)光在醫(yī)學(xué)中的作用和地位如何？山西浦光生物均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別

研究細胞內(nèi)信號通路的動態(tài)變化，需要能在細胞裂解液甚至活細胞背景下進行快速、多通路的分析。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)完美契合這一需求。例如，使用基于Alpha或類似技術(shù)的磷酸化特異性免疫檢測，可以在同一塊板中，從細胞裂解液中直接定量多種信號蛋白（如Akt、ERK、STAT）在不同刺激條件下的磷酸化水平。整個過程無需Western Blot的凝膠電泳、轉(zhuǎn)膜和繁瑣的封閉孵育洗滌步驟，通量提高數(shù)百倍，且能實現(xiàn)精確定量。此外，基于化學(xué)發(fā)光的報告基因檢測（如熒光素酶）也被普遍用于監(jiān)測特定信號通路（如Wnt、Hedgehog、NF-κB）的轉(zhuǎn)錄活性，用于功能性篩選和機理研究。山西浦光生物均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別