HEK293細(xì)胞源自人胚腎細(xì)胞，在細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域應(yīng)用較廣，例如用于病毒載體生產(chǎn)等。盡管生物制品會(huì)經(jīng)過多步純化工藝去除相關(guān)雜質(zhì)，但微量殘留的宿主細(xì)胞蛋白（HCP）仍可能引發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答，進(jìn)而影響產(chǎn)品質(zhì)量與安全性。因此，需對(duì)生產(chǎn)工藝中殘留的HEK293 HCP開展定量檢測(cè)，確保其符合產(chǎn)品放行標(biāo)準(zhǔn)。湖州申科生物的HEK293 HCP殘留檢測(cè)試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），適用于對(duì)HEK293及HEK293T來源生物制品（如重組蛋白類、細(xì)胞和基因治療類等）中的宿主細(xì)胞蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)。該試劑盒檢測(cè)步驟少、速度快，且具備專一性強(qiáng)、性能穩(wěn)定可靠的特點(diǎn)。

湖州申科生物依托先進(jìn)的整合技術(shù)平臺(tái)，在 HCP 檢測(cè)領(lǐng)域構(gòu)筑優(yōu)勢(shì)。公司自主研發(fā)出突破性技術(shù)，包括基于 IMBS 的抗體覆蓋率檢測(cè)方法與基于核酸文庫(kù)的低豐度 HCP 富集技術(shù)，有效提升 HCP 檢測(cè)靈敏度與抗體覆蓋能力，相關(guān)成果已在《中國(guó)新藥雜志》《藥物分析雜志》等期刊發(fā)表，且被納入國(guó)家科技重大專項(xiàng)。同時(shí)，借助前沿的精密分析平臺(tái)，湖州申科打造了覆蓋完整 HCP 分析鏈條的 LC-MS 解決方案，涵蓋抗原一致性評(píng)價(jià)、IMBS 前處理、低豐度蛋白富集、生信分析及專屬數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，構(gòu)建起從樣品管理到風(fēng)險(xiǎn)分析的閉環(huán)體系。該平臺(tái)嚴(yán)格遵循法規(guī)要求，所有檢測(cè)技術(shù)均通過符合 ICH 及藥典標(biāo)準(zhǔn)的方法學(xué)驗(yàn)證，確保檢測(cè)數(shù)據(jù)可靠，且滿足生物制品申報(bào)（如 IND/BLA）的法規(guī)要求。憑借這一技術(shù)整合能力，公司已為國(guó)內(nèi)外上百家生物醫(yī)藥企業(yè)提供從工藝開發(fā)到質(zhì)控放行的一站式 HCP 檢測(cè)服務(wù)，助力單抗、疫苗等產(chǎn)品提升安全性與合規(guī)性。

湖州申科生物專注于研發(fā)貼合實(shí)際生產(chǎn)工藝的商業(yè)化宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)試劑盒，依托不同工藝下 HCP 的差異化分析，針對(duì)性推出各細(xì)分工藝領(lǐng)域的 HCP 檢測(cè)試劑盒。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示：針對(duì) CHO-S 與 CHO-K1 兩種宿主細(xì)胞，兩類細(xì)胞共享 2458 種相同 HCP（占比 79.7%），但各自存在 392 種和 236 種特異性 HCP，充分體現(xiàn)工藝差異帶來的殘留蛋白特異性。進(jìn)一步對(duì)比 B3 表達(dá)菌與 K2 克隆菌，盡管二者共享 1489 種相同蛋白（分別占比 88% 和 85%），但仍各自檢出 208 種和 258 種獨(dú)有蛋白，差異率為 12%-15%。這些結(jié)果直接證實(shí)，不同工藝路線與克隆株選擇會(huì)影響 HCP 殘留譜的構(gòu)成。據(jù)此，湖州申科提出 “工藝定制化檢測(cè)” 策略：通過準(zhǔn)確識(shí)別共性與特異性 HCP，針對(duì)性研發(fā)細(xì)分試劑盒產(chǎn)品。

湖州申科生物憑借自主可控的供應(yīng)鏈與經(jīng)嚴(yán)格驗(yàn)證的技術(shù)性能，確保 HCP 檢測(cè)試劑盒的長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)及出色分析能力。一方面，公司實(shí)現(xiàn)關(guān)鍵物料自研自產(chǎn)：校準(zhǔn)品通過凍干工藝大規(guī)模生產(chǎn)，能穩(wěn)定儲(chǔ)存 10 年以上；抗體經(jīng)大動(dòng)物免疫制備，產(chǎn)量可支撐≥10,000 盒試劑盒生產(chǎn)，確保同批次抗體連續(xù)供應(yīng)超 10 年；試劑盒經(jīng)多批次驗(yàn)證，批內(nèi)與批間一致性表現(xiàn)良好。另一方面，所有產(chǎn)品均參照 ICH Q2（R2）及 ICH M10 法規(guī)要求完成驗(yàn)證：以大腸桿菌（E.coli）HCP 產(chǎn)品為例，其線性范圍（1-243 ng/mL）的 R2>0.999，各濃度點(diǎn)回收率偏差≤5%；準(zhǔn)確度處于 81.2%-111.6% 區(qū)間，中間精密度 CV 值為 5.7%-12.4%；定量限（LLOQ）低至 1.5 ng/mL，且對(duì) CHO、HEK293 等多種宿主細(xì)胞的交叉反應(yīng)均低于檢測(cè)限。同時(shí)，借助二維電泳（檢出 826 個(gè)蛋白點(diǎn)）與質(zhì)譜法（鑒定 2204 個(gè)蛋白點(diǎn)）對(duì)校準(zhǔn)品進(jìn)行雙重表征，并運(yùn)用 IMBS-2D（覆蓋率 > 70%）與 IMBS-MS（覆蓋率 84.7%）正交技術(shù)驗(yàn)證抗體覆蓋率，從源頭保障檢測(cè)結(jié)果的全面性與可靠性。

樣品質(zhì)量是影響宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)結(jié)果的因素之一。HCP 檢測(cè)覆蓋生物制品生產(chǎn)全流程，包含收獲、純化、制備等多個(gè)環(huán)節(jié)，不同樣品基質(zhì)會(huì)導(dǎo)致 HCP 檢測(cè)結(jié)果存在明顯差異。以含佐劑的疫苗為例，佐劑會(huì)產(chǎn)生干擾，導(dǎo)致成品中難以檢測(cè) HCP，因此通常在吸附工藝前的原液階段開展檢測(cè)。此外，樣品的收集、處理及保存方式也對(duì)檢測(cè)結(jié)果有重要影響。處理方式不當(dāng)可能造成蛋白降解或變性，進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果。比如將歷史批樣品用作內(nèi)部質(zhì)控品時(shí)，需結(jié)合其穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，合理設(shè)定保存條件與保存期限，以此保障檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

在宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方面，工藝特異型檢測(cè)試劑盒（upstream-process）專門針對(duì)特定生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì)，其關(guān)鍵特征是依托產(chǎn)物的實(shí)際宿主細(xì)胞開展開發(fā)及驗(yàn)證，通過模擬真實(shí)生產(chǎn)流程制備廣譜 HCP 抗原，且要求抗血清具備高覆蓋率以適配工藝變動(dòng)，從而保障對(duì)特定生產(chǎn)流程中 HCP 殘留的高度準(zhǔn)確監(jiān)控。平臺(tái)型檢測(cè)試劑盒（platform）則由生產(chǎn)商圍繞特定表達(dá)宿主細(xì)胞及相近工藝自主開發(fā)，優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在能借助相同參考標(biāo)準(zhǔn)品與試劑，統(tǒng)一監(jiān)測(cè)基于該宿主細(xì)胞生產(chǎn)的不同產(chǎn)品，適用于上游工藝足夠相似的產(chǎn)品線。通用型檢測(cè)試劑盒（commercial）屬于市售廣譜檢測(cè)方案，適合相似宿主細(xì)胞的常規(guī) HCP 檢測(cè)；但由于其制備過程未必能完全模擬目標(biāo)產(chǎn)物的實(shí)際生產(chǎn)場(chǎng)景，因此需嚴(yán)格評(píng)估多克隆抗體對(duì)特定產(chǎn)品 HCP 的覆蓋率，以此確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。這三類試劑盒覆蓋了從深度定制到通用篩查的各類 HCP 檢測(cè)需求。