上海單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比
來源：
發布時間：2025-10-24
LC-MS技術作為生物制品宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測的新趨勢，應用時需重點考慮以下五方面：①穩定性：需對HCPs的LC-MS檢測流程開展驗證，全流程需實施嚴格QC管控，以保障檢測結果的一致性與穩定性。②可重復性：不同類型生物制品中HCPs的提取效率存在差異，且不同人員操作會產生偏差，因此需在上機前通過多種方法評估HCPs提取效率，規避人為因素導致的結果重復性不佳問題。③準確度：在方法開發與驗證階段，需設置內標并確定定量算法，通過內標響應回算得出HCPs含量，以此保證定量結果的準確性。④抗干擾能力：高豐度蛋白與特殊基質會干擾質譜檢測，需借助前處理手段去除高豐度蛋白或特殊基質，從而降低其對HCPs肽段質譜檢測的影響。⑤真實性：樣品中除HCPs外的其他物質在質譜分析中也會產生質譜信號，需去除復雜背景噪音以避免假陽性與假陰性情況，同時建立規范的生信分析流程。在分析流程搭建過程中，同樣需制定嚴格的QC標準，并通過后續多種方法驗證，明確該標準的真實性。
湖州申科自主開發的抗體覆蓋率驗證IMBS平臺經完善驗證，結果可靠，符合法規要求，可用于申報。上海單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比
方法選擇是影響宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測結果的因素之一。酶聯免疫吸附法（ELISA）與液相色譜 - 質譜聯用技術（LC-MS），是當前 HCP 檢測領域的兩類常用方法。據文獻統計，當前在總 HCP 定量檢測中，ELISA 仍為主流技術；而 MS 法可用于特定蛋白（如高風險蛋白）的鑒定與定量，已成為重要的互補手段。此外，檢測過程中所用試劑與耗材的質量，會直接影響檢測結果的準確性。質量不達標的試劑，可能引發檢測結果出現假陽性或假陰性。舉例來說，若抗體的特異性與親和力不足，可能在 ELISA 檢測中產生交叉反應；若抗原代表性不足或抗體覆蓋率偏低，則可能造成漏檢；而稀釋液抗干擾能力較弱時，也會對檢測準確性產生影響。相關案例研究顯示，采用定制化方法替代原有商業化試劑盒后，抗原代表性與抗體覆蓋率明顯提升，HCP 檢測值也呈現整體升高的趨勢。
廣東重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析定制化宿主細胞蛋白殘留檢測試劑盒抗原校準品更具代表性，減少HCP漏檢和定量誤差。
湖州申科運用免疫磁珠分離技術（IMBS），搭配 2D 電泳或 LC-MS 技術評估抗體覆蓋率。IMBS 的主要流程涵蓋：多克隆抗體與磁珠的偶聯反應、磁珠未結合位點的封閉處理、HCP 樣本與結合抗體的磁珠共同孵育反應。該過程中，HCP 抗體會結合可識別的 HCP，未被識別的 HCP 則通過后續洗滌步驟去除，隨后借助低 pH 等洗脫條件，收集抗體捕獲的 HCP。此方法具備 AAE（抗體親和提取，Antibody Affinity Extraction）免疫層析柱分離的全部優勢，同時免疫磁珠可在懸浮狀態下與 HCP 樣品充分混勻并結合，HCP 結合效果更優；且依托磁珠吸附，能減少 HCP 與填料的非特異性吸附，進一步提升實驗準確性。
憑借高分辨質譜技術，湖州申科生物推出宿主細胞蛋白定制化檢測服務組合，可滿足生物制品殘留蛋白的分析需求。該平臺服務內容包括：1、HCP蛋白檢測定制化服務：借助ELISA、雙向電泳（2D）與LC-MS/MS技術，為常規生物制品檢測、高危及工藝相關蛋白數據庫搭建、特殊生物制品分析提供支持；2、抗體覆蓋率服務：運用自主研發的IMBS技術結合質譜，準確評估ELISA試劑盒對工程細胞HCP的捕獲能力，同時完成校準品表征；3、靶向HCP檢測：專注于高風險殘留蛋白的檢測方法開發；4、蛋白種屬鑒定服務：利用LC-MS技術追溯樣品中的物種特異性肽段。該服務體系以多技術聯用和深度定制化策略為支撐，可滿足從基礎篩查到工藝關鍵雜質監控的全維度需求。
SHENTEK? AutoElisa-4K HCP 檢測自動化系統可減少人為誤差，滿足 21 CFR Part 11 數據管理要求。
宿主細胞蛋白（HCP）多與細胞關鍵功能相關，像細胞增殖、基因轉錄、蛋白合成修飾、細胞存活及凋亡等，工藝過程中會通過細胞分泌，或因細胞死亡、裂解而釋放。生產環節中，主要有三方面因素影響HCP的組成與豐度：①宿主細胞基因組調控及培養工藝：特定工藝下潛在HCP數量可能極多，且并非所有基因都會表達，部分基因的表達存在時間與條件差異；例如大腸桿菌約含4300個基因，不同工藝產物會經歷獨特的翻譯后修飾，增加HCP的總數與生化復雜性。研究表明，大腸桿菌表達的蛋白存在數量差異，這可能是對環境條件的適應性反應，但85-90%有潛在免疫原性的HCP在不同發酵過程中均會出現。②產物表達方式：宿主細胞與外源基因、載體及輔助成分構成的體系，可實現穩定、瞬時及誘導表達；以大腸桿菌為例，常見的表達形式包括胞內表達、分泌表達、可溶性表達、不溶性包涵體形式，以及融合與非融合表達。③純化步驟及產品自身特性：純化過程中能去除99%以上的HCP，但仍有殘留HCP保留在產品中，這些殘留HCP可能與產品結合，隨產品一同完成純化。
不同培養工藝和產物表達影響 HCP 的數量和生化復雜性。北京疫苗產品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證湖州申科宿主細胞蛋白殘留檢測試劑盒開發遵循 ISO 13485 體系，滿足法規申報要求。上海單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比
宿主細胞蛋白（HCP）多與細胞關鍵功能相關，例如細胞增殖、基因轉錄、蛋白合成修飾、細胞存活及凋亡等，在生產工藝中會因細胞分泌、死亡或裂解而釋放。生產過程里，有三大因素主要影響 HCP 的組成與豐度：①宿主細胞基因組調控及培養工藝：特定工藝下，潛在 HCP 數量可能極多，且并非所有基因都會表達，部分基因的表達具有時間和條件特異性；像大腸桿菌約含 4300 個基因，不同工藝產物會經歷獨特的翻譯后修飾，這增加了 HCP 的總數與生化復雜性。研究顯示，大腸桿菌表達的蛋白間存在數量差異，這種差異可能是對環境條件的適應性反應，但 85-90% 具有潛在免疫原性的 HCP 在不同發酵過程中均會出現。②產物表達方式：宿主細胞與外源基因、載體及輔助成分構成的體系，可實現穩定、瞬時及誘導表達；以大腸桿菌為例，常見表達形式包括胞內表達、分泌表達、可溶性表達、不溶性包涵體形式，還有融合與非融合表達。③純化步驟及產品自身特性的影響：純化過程中能去除 99% 以上的 HCP，但仍有少量殘留 HCP 留在產品中，這些殘留 HCP 可能與產品結合，隨產品一同被純化。
上海單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比
下一篇：
抗體藥物內毒素檢測技術升級
相關新聞
- 上海高效熱原檢測MAT試劑盒 2025-12-19
- PG13宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析 2025-12-19
- CHO宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證 2025-12-19
- 北京高效內毒素檢測商業化試劑盒 2025-12-19
- 北京通用型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體制備 2025-12-19
- 江蘇生物制品內毒素檢測重組級聯試劑（rCR） 2025-12-19
- 北京通用型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測 2025-12-19
- 浙江定制化宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證 2025-12-19
- SV40LTA&E1A宿主細胞殘留DNA檢測 2025-12-19
- 江蘇細菌內毒素檢測結果判定 2025-12-19
推薦新聞
- 醫療器械結扎夾掛網 2025-12-20
- 山西國內助膝器運動人群 2025-12-20
- 綜合醫院一體化臨床系統優點 2025-12-20
- 洛龍口碑好的老年護理機構 2025-12-20
- 國內固定式車輛通道監測儀儀器維修 2025-12-20
- 濃縮銀杏的功效與作用 2025-12-20
- 浙江宮腔鏡醫學影像工作站安裝培訓 2025-12-20
- 云南核酸植絨拭子全國發貨 2025-12-20
- 福建智能聯網智能醫廢管理收集車直銷廠家 2025-12-20
- 什么是生物檢測試劑盒歡迎選購 2025-12-20