云南MDCK宿主細胞殘留DNA檢測常用知識
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發(fā)布時間:2025-12-11
SHENTEK®Hi5&AcNPV殘留DNA檢測試劑盒(多重PCR-熒光探針法),可對昆蟲細胞(HighFive)桿狀病毒表達系統(tǒng)所生產(chǎn)的基因工程疫苗內(nèi),殘留的Hi5細胞DNA與桿狀病毒(AcNPV)DNA開展定量檢測。該試劑盒依托熒光探針原理,結合多重qPCR技術實現(xiàn)對樣品中Hi5及AcNPV殘留DNA的定量,不僅檢測效率高、專一性突出,且性能穩(wěn)定可靠,檢測限可達到50 copies/反應,試劑盒內(nèi)還配套提供Hi5&AcNPV定量參考品。此試劑盒與SHENTEK®宿主細胞殘留DNA樣本前處理試劑盒搭配使用,能夠準確定量樣品內(nèi)殘留的Hi5&AcNPV微量DNA,保障檢測結果的可靠性。
鋁佐劑、高蛋白等基質(zhì)干擾,需通過宿主細胞殘留 DNA 檢測的樣品前處理予以解決。云南MDCK宿主細胞殘留DNA檢測常用知識
SHENTEK® CV-1 殘留 DNA 定量檢測試劑盒基于實時熒光探針 PCR 技術,可針對生物制藥工藝流程中的中間品、半成品及成品,實現(xiàn) CV-1 宿主細胞 DNA 的準確、快速定量分析。該試劑盒通過高特異性的引物-探針體系,能夠在復雜基質(zhì)中識別 CV-1 DNA,檢測下限可達 fg 級,線性范圍寬,結果重現(xiàn)性優(yōu)異。試劑盒內(nèi)附帶經(jīng)溯源校準的 CV-1 DNA 定量參考品,可直接建立標準曲線,簡化實驗流程。同時,本品與 SHENTEK® 宿主細胞殘留 DNA 樣本前處理試劑盒配套使用,通過對裂解、吸附、洗滌及洗脫步驟的系統(tǒng)優(yōu)化,明顯提高了微量 CV-1 DNA 的回收效率,降低基質(zhì)干擾,確保定量結果的高準確度與高靈敏度。整體方案操作便捷,為生物制品的安全性評價提供可靠支撐。云南MDCK宿主細胞殘留DNA檢測常用知識對宿主細胞殘留 DNA 檢測方法性能而言,定量限是重要評價指標。
SHENTEK® MRC-5 殘留 DNA 檢測試劑盒,可對各類生物制品中間品、半成品及成品中的 MRC-5 宿主細胞 DNA 進行定量檢測。該試劑盒基于熒光探針原理,實現(xiàn)對樣品中 MRC-5 殘留 DNA 的定量分析,具備檢測速度快、專一性突出、性能穩(wěn)定可靠的優(yōu)勢,檢測限可達到 fg 級別,且試劑盒內(nèi)配備 MRC-5 DNA 定量參考品。該試劑盒與 SHENTEK® 宿主細胞殘留 DNA 樣本前處理試劑盒搭配使用,準確完成樣品中 MRC-5 殘留 DNA 的定量檢測。整個分析系統(tǒng)通過優(yōu)化前處理與檢測步驟的適配性,提升 MRC-5 細胞微量 DNA 殘留的回收率及定量準確度。
湖州申科生物疫苗制劑宿主細胞殘留DNA樣本前處理試劑盒,采用磁珠法進行核酸提取純化。結合疫苗制劑的產(chǎn)品特性,該試劑盒優(yōu)化了試劑配方,適用于疫苗成品(如Vero細胞生產(chǎn)的狂犬病疫苗)中Vero殘留DNA的樣品前處理,能穩(wěn)定高效獲取樣品中的痕量DNA,可與各款SHENTEK®宿主細胞DNAqPCR檢測試劑盒搭配使用。此外,該試劑盒可借助rHCDpurify®前處理系統(tǒng)實現(xiàn)樣品自動處理。若樣品含鋁佐劑或右旋糖苷,具體處理方式可咨詢湖州申科生物技術股份有限公司。
控制宿主細胞殘留 DNA 含量,對保障生物制品安全性具有重要意義。
啟動宿主細胞殘留 DNA(HCD)檢測方法驗證前,需圍繞文件要求與樣品處理兩大維度做好準備。文件要求上,應通過研究方案、研究計劃、報告或標準操作程序(SOP),提前明確規(guī)范生物分析方法的具體內(nèi)容,為后續(xù)驗證奠定合規(guī)基礎。樣品處理方面,若檢測中樣品出現(xiàn)抑制現(xiàn)象,可考慮采用稀釋方式解決,但稀釋后的檢測值需處于可信區(qū)間內(nèi);對于復雜樣品,若稀釋無法消除抑制影響,則需通過樣品前處理手段提取 DNA 后再開展檢測,以此保障檢測結果的準確可靠,確保 HCD 方法驗證高效、順利推進。
引物探針設計與熒光基團選擇,是宿主細胞殘留 DNA 檢測體系搭建的關鍵所在。云南MDCK宿主細胞殘留DNA檢測常用知識
宿主細胞殘留 DNA 檢測的關鍵環(huán)節(jié)之一是方法驗證,包括線性、專屬性等關鍵指標。云南MDCK宿主細胞殘留DNA檢測常用知識
疫苗、抗體、重組蛋白、多肽及小分子藥物等產(chǎn)品,多借助連續(xù)傳代細胞系進行表達生產(chǎn)。即便經(jīng)過多步純化工藝處理,終產(chǎn)品中仍可能殘留源自宿主細胞的 DNA(即 Host cell DNA,簡稱 HCD)。HCD 中可能含有功能基因,若其中存在顯性致病基因或病毒基因組,未經(jīng)驗證、未充分去除或滅活的 HCD 殘留在制品內(nèi),可能通過基因?qū)用娴碾S機插入突變,或是誘發(fā)過度 / 異常的免疫原性反應,給用藥者造成不可預測的重大健康風險。由此可見,對宿主細胞殘留 DNA 開展定量檢測,對于監(jiān)測藥物產(chǎn)品的安全性與質(zhì)量可控性而言,具有重要意義。
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