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相較于傳統(tǒng)家兔法，熱原檢測(cè)MAT法在動(dòng)物福利、檢測(cè)性能、適用范圍等方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。從動(dòng)物福利看，MAT法使用分離培養(yǎng)的單核細(xì)胞系（如湖州申科 HL-60 細(xì)胞系），無需動(dòng)物，完全符合 “減少、替代、優(yōu)化” 的 3R 原則，規(guī)避家兔法的倫理爭議與飼養(yǎng)成本。檢測(cè)性能上，家兔法只能定性且靈敏度低（檢測(cè)限≥5EU/kg），結(jié)果受動(dòng)物個(gè)體差異、環(huán)境溫度影響大；MAT 法可定量檢測(cè)，標(biāo)曲線性范圍 0.0125-1.0EU/mL，檢測(cè)限（LOD）達(dá) 0.0125EU/mL，批間 CV≤25%，重復(fù)性更優(yōu)。適用范圍方面，家兔法不適用于放射性質(zhì)藥物、基因療法制劑等可能影響動(dòng)物體溫的產(chǎn)品；MAT法適配疫苗、...

隨著發(fā)熱反應(yīng)分子機(jī)制研究的不斷深化，單核細(xì)胞活化試驗(yàn)（MAT）作為一種體外熱原檢測(cè)技術(shù)，愈發(fā)受到醫(yī)藥與醫(yī)療器械行業(yè)的關(guān)注并逐步推廣應(yīng)用。該方法的原理是：讓人體全血與待檢樣品中的熱原充分接觸后，通過檢測(cè)體系中產(chǎn)生的 IL-1β、IL-6（因穩(wěn)定性強(qiáng)、重復(fù)性優(yōu)，常作為關(guān)鍵檢測(cè)指標(biāo)）、TNF 等促炎細(xì)胞因子含量，實(shí)現(xiàn)對(duì)熱原污染程度的評(píng)估，整個(gè)過程能高度模擬人體先天免疫系統(tǒng)對(duì)熱原的應(yīng)答反應(yīng)。相較于傳統(tǒng)熱原檢測(cè)手段，MAT 的優(yōu)勢(shì)更為突出：不僅可檢出各類熱原污染物，包括尚未明確性質(zhì)的未知熱原，以及革蘭氏陽性菌（脂磷壁酸）、真菌、病毒等產(chǎn)生的非內(nèi)毒素?zé)嵩?，填補(bǔ)了傳統(tǒng)內(nèi)毒素檢測(cè)（如鱟試劑法）的覆蓋空白。...

MAT法熱原檢測(cè)中，非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EP）對(duì)照品設(shè)為 “選做”，且試劑盒不默認(rèn)配備，需結(jié)合檢測(cè)需求靈活使用，背后有明確的設(shè)置邏輯。首先，試劑盒開發(fā)階段已通過驗(yàn)證（用多種 NEP 配體刺激細(xì)胞），證明其可檢出 NEP，后期實(shí)驗(yàn)是否加入 NEP 對(duì)照，只需根據(jù)內(nèi)部管理要求或?qū)I(yè)人員建議確定，無需強(qiáng)制設(shè)置；若產(chǎn)品產(chǎn)線明確無 NEP 污染風(fēng)險(xiǎn)（如只使用革蘭氏陰性菌原料），可刪除 NEP 對(duì)照，簡化操作。其次，試劑盒不配備 NEP 對(duì)照品，是因不同用戶需求差異大 —— 部分用戶需檢測(cè)特定 NEP（如脂磷壁酸），部分需檢測(cè)廣譜 NEP，因此提供單獨(dú)購買選項(xiàng)，用戶可按需選擇，避免資源浪費(fèi)。NEP 對(duì)照品...

歐盟在熱原檢測(cè)方法選擇上，以動(dòng)物保護(hù)和檢測(cè)準(zhǔn)確性為導(dǎo)向，形成明確的法規(guī)傾向。首先，歐盟禁止家兔法（PRT 法）這類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，要求采用替代方法，單核細(xì)胞活化試驗(yàn)（MAT 法）因符合 3R 原則（替代、減少、優(yōu)化），被納入歐洲藥典（EP2.6.30），成為熱原檢測(cè)的主流替代方法。其次，對(duì)于鱟試劑法，歐盟雖未禁止（因其屬于鱟血提取而非動(dòng)物實(shí)驗(yàn)），但出于鱟資源保護(hù)考量，推薦使用重組 C 因子法（EP2.6.32），該方法無需依賴鱟血，通過基因工程技術(shù)制備試劑，避免資源衰減與生態(tài)爭議。此外，美國藥典（USP）和日本藥典（JP）也同步推薦重組試劑（含重組級(jí)聯(lián)試劑 rCR），形成國際法規(guī)協(xié)同趨勢(shì)。需注意...

中國藥典與歐洲藥典對(duì) MAT 熱原檢測(cè)的細(xì)胞類型及復(fù)孔數(shù)有明確要求，且存在細(xì)節(jié)差異。細(xì)胞類型上，兩者均認(rèn)可人全血、PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞，至少 4 個(gè)供體，歐洲藥典建議 8 個(gè)供體），中國藥典明確將單核細(xì)胞系納入，歐洲藥典則要求單核細(xì)胞系需做支原體污染檢測(cè)、細(xì)胞鑒別等；檢測(cè)方法均為 “熱原刺激細(xì)胞 + ELISA 檢測(cè) IL-6/IL-1β/TNF-α”。復(fù)孔數(shù)方面，兩者均規(guī)定平行孔≥4、濃度點(diǎn)≥4，中國藥典額外要求標(biāo)曲 r≥0.90，主要目的是通過多重復(fù)孔抵消 PBMC 的不穩(wěn)定性，確保熱原檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 熱原檢測(cè)技術(shù)百年演進(jìn)，關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)力是靈敏度、速度與動(dòng)物福利的平衡。天津熱原檢...

PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）的供體差異會(huì)直接導(dǎo)致熱原檢測(cè)結(jié)果的波動(dòng)，主要體現(xiàn)在 IL-6 釋放水平的不一致。不同供體的 PBMC，其單核細(xì)胞比例、TLR 受體表達(dá)量、免疫活性狀態(tài)存在差異：有的供體 PBMC 受熱原刺激后， IL-6 釋放量高；有的則極低，甚至無明顯響應(yīng)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示， PBMC 的標(biāo)曲各濃度點(diǎn)相對(duì)偏差有高達(dá) 171.43%的，正是這種差異的體現(xiàn)，導(dǎo)致熱原檢測(cè)結(jié)果難以標(biāo)準(zhǔn)化，無法準(zhǔn)確判斷供試品熱原是否超標(biāo)，從而增加了藥品的質(zhì)量控制風(fēng)險(xiǎn)。 一旦熱原涌入人體循環(huán)系統(tǒng)，致熱因子直抵下丘腦體溫中樞，導(dǎo)致調(diào)定點(diǎn)上移、產(chǎn)熱升散熱降，體溫隨之飆升。疫苗熱原檢測(cè)技術(shù)服務(wù) MAT 法熱原檢...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒（貨號(hào) 1502100，規(guī)格 96 測(cè)試 / 盒）優(yōu)勢(shì)在于搭載 MAT 特定單核細(xì)胞系，細(xì)胞表面表達(dá)多種 Toll 樣受體（TLR），可響應(yīng)不同類型熱原。該細(xì)胞系來源清晰、可溯源，均一性強(qiáng)且無供體依賴，有效規(guī)避了傳統(tǒng) PBMC 因供體差異導(dǎo)致的結(jié)果波動(dòng)，同時(shí)安全風(fēng)險(xiǎn)低，無需擔(dān)憂外源因子污染。試劑盒采用 “標(biāo)準(zhǔn)化單核細(xì)胞 + ELISA 檢測(cè)” 一體化體系，通過嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量控制（如凍存復(fù)融后活率達(dá)標(biāo)），確保每次檢測(cè)的細(xì)胞狀態(tài)一致；搭配預(yù)包被 IL-6 抗體的酶標(biāo)板與配套試劑，進(jìn)一步減少體系誤差。從標(biāo)曲數(shù)據(jù)來看，其擬合采用 4-Parameter Log...

MAT 法與傳統(tǒng)家兔法在熱原檢測(cè)中，性能差異明顯，MAT 法在準(zhǔn)確性、效率與合規(guī)性上更具優(yōu)勢(shì)。從結(jié)果評(píng)判來看，MAT 法以 “加標(biāo)回收率 50%-200%、供試品濃度 < 規(guī)定限值（CLC）” 為合格標(biāo)準(zhǔn)，靈敏度達(dá) 0.0125EU/mL，可準(zhǔn)確定量熱原濃度；而家兔法只能定性（觀察體溫升高），靈敏度低（約 0.1-0.5EU/mL），易因家兔個(gè)體差異（如免疫狀態(tài)、應(yīng)激反應(yīng)）導(dǎo)致假陰性。從檢測(cè)效率來看，MAT 法樣品與細(xì)胞共培養(yǎng) 24 小時(shí)即可出結(jié)果，且可批量檢測(cè)（96 孔板一次處理多個(gè)樣品）；家兔法需連續(xù)觀察 72 小時(shí)，每次只能檢測(cè)少量樣品，耗時(shí)且人力成本高。從合規(guī)性來看，MAT 法不使...

傳統(tǒng)熱原檢測(cè)方法的局限性十分明顯：鱟試驗(yàn)法只能特異性識(shí)別細(xì)菌內(nèi)毒素，對(duì)非內(nèi)毒素?zé)嵩耆珶o響應(yīng)；家兔熱原試驗(yàn)雖能篩查全類型熱原，但靈敏度低（檢測(cè)限≥5EU/kg），無法檢出微量非內(nèi)毒素?zé)嵩?，且無法區(qū)分熱原類型，難以追溯污染源頭；單核細(xì)胞活化反應(yīng)測(cè)定（MAT）的出現(xiàn)有效解決了上述難題，其關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)在于：基于人源單核細(xì)胞的免疫應(yīng)答機(jī)制，可同時(shí)識(shí)別所有具備生物活性的熱原（包括內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素），且檢測(cè)靈敏度高（對(duì)病毒熱原檢測(cè)限低至pg級(jí)）；檢測(cè)周期短（24-48小時(shí)），可滿足產(chǎn)品快速放行需求；能通過細(xì)胞因子濃度定量評(píng)估熱原活性，避免“無活性熱原”的誤判。 熱原檢測(cè)技術(shù)百年演進(jìn)，關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)力是靈敏度、速...

MAT法熱原檢測(cè)中，非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EP）對(duì)照品設(shè)為 “選做”，且試劑盒不默認(rèn)配備，需結(jié)合檢測(cè)需求靈活使用，背后有明確的設(shè)置邏輯。首先，試劑盒開發(fā)階段已通過驗(yàn)證（用多種 NEP 配體刺激細(xì)胞），證明其可檢出 NEP，后期實(shí)驗(yàn)是否加入 NEP 對(duì)照，只需根據(jù)內(nèi)部管理要求或?qū)I(yè)人員建議確定，無需強(qiáng)制設(shè)置；若產(chǎn)品產(chǎn)線明確無 NEP 污染風(fēng)險(xiǎn)（如只使用革蘭氏陰性菌原料），可刪除 NEP 對(duì)照，簡化操作。其次，試劑盒不配備 NEP 對(duì)照品，是因不同用戶需求差異大 —— 部分用戶需檢測(cè)特定 NEP（如脂磷壁酸），部分需檢測(cè)廣譜 NEP，因此提供單獨(dú)購買選項(xiàng)，用戶可按需選擇，避免資源浪費(fèi)。NEP 對(duì)照品...

湖州申科生物熱原檢測(cè)（MAT法） 試劑盒在靈敏度、穩(wěn)定性與適用性上表現(xiàn)突出，關(guān)鍵性能參數(shù)符合藥典要求：標(biāo)曲線性范圍 0.0125-1.0EU/mL，相關(guān)系數(shù) R2≥0.98，定量限 0.025EU/mL，檢測(cè)限（LOD）0.0125EU/mL，批間精密度 CV≤25%，可準(zhǔn)確捕捉微量熱原。其優(yōu)勢(shì)在于特定的單核細(xì)胞系 —— 與依賴供體血液的 PBMC 細(xì)胞不同，申科 MAT 細(xì)胞系來源清晰可溯源，無需倫理審批與血站合作，規(guī)避供體差異導(dǎo)致的檢測(cè)波動(dòng)。對(duì)比同類型產(chǎn)品（如國外廠家 PBMC 細(xì)胞），申科細(xì)胞系的標(biāo)曲各濃度點(diǎn) CV 更低（ 低至3.6%）、相對(duì)偏差更?。?12.31%），線性 R2 ...

MAT 試劑盒熱原檢測(cè)配套細(xì)胞的質(zhì)量控制，是保障檢測(cè)結(jié)果可靠的重要環(huán)節(jié)，需從功能、安全性、穩(wěn)定性三方面建立體系。在功能鑒定上，按歐洲 MAT 法要求，需檢測(cè)細(xì)胞的 Toll 樣受體（TLR1-TLR9）表達(dá)情況—確保細(xì)胞能響應(yīng)不同類型熱原（如 TLR4 響應(yīng) LPS、TLR2/6 響應(yīng)脂磷壁酸）；同時(shí)考察細(xì)胞倍增時(shí)間（確?；钚苑€(wěn)定）、熱原反應(yīng)性（對(duì)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素和非內(nèi)毒素?zé)嵩男盘?hào)強(qiáng)度），確保細(xì)胞具備熱原識(shí)別與炎癥因子分泌能力。在安全性檢測(cè)上，需驗(yàn)證細(xì)胞無菌（無細(xì)菌、真菌污染）、無支原體、無外源病毒因子（如 HIV、HBV）及分枝桿菌，避免外源污染影響檢測(cè)結(jié)果。在穩(wěn)定性考察上，需監(jiān)測(cè)不同代次細(xì)...

湖州申科生物熱原檢測(cè)試劑盒（MAT 法，貨號(hào) 1502100）包含完整的檢測(cè)體系，組分按功能可分為細(xì)胞培養(yǎng)類、ELISA 檢測(cè)類與輔助類，且儲(chǔ)存條件明確。細(xì)胞培養(yǎng)類組分包括：2-8℃儲(chǔ)存的培養(yǎng)液（25mL×2 瓶）、96 孔細(xì)胞孵育板，-18℃儲(chǔ)存的培養(yǎng)液添加劑（1.5mL×1 管）、細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，以及需液氮保存的 MAT 細(xì)胞（2 支），確保細(xì)胞活性與穩(wěn)定性。ELISA 檢測(cè)類組分涵蓋：2-8℃儲(chǔ)存的生物素偶聯(lián)抗 IL-6 抗體（200×，60μL）、鏈霉親和素 HRP 復(fù)合物（100×，140μL）、TMB 顯色液（12mL）、終止液（6mL），以及抗 IL-6 預(yù)包被酶標(biāo)板（...

隨著發(fā)熱反應(yīng)分子機(jī)制研究的不斷深化，單核細(xì)胞活化試驗(yàn)（MAT）作為一種體外熱原檢測(cè)技術(shù)，愈發(fā)受到醫(yī)藥與醫(yī)療器械行業(yè)的關(guān)注并逐步推廣應(yīng)用。該方法的原理是：讓人體全血與待檢樣品中的熱原充分接觸后，通過檢測(cè)體系中產(chǎn)生的 IL-1β、IL-6（因穩(wěn)定性強(qiáng)、重復(fù)性優(yōu)，常作為關(guān)鍵檢測(cè)指標(biāo)）、TNF 等促炎細(xì)胞因子含量，實(shí)現(xiàn)對(duì)熱原污染程度的評(píng)估，整個(gè)過程能高度模擬人體先天免疫系統(tǒng)對(duì)熱原的應(yīng)答反應(yīng)。相較于傳統(tǒng)熱原檢測(cè)手段，MAT 的優(yōu)勢(shì)更為突出：不僅可檢出各類熱原污染物，包括尚未明確性質(zhì)的未知熱原，以及革蘭氏陽性菌（脂磷壁酸）、真菌、病毒等產(chǎn)生的非內(nèi)毒素?zé)嵩?，填補(bǔ)了傳統(tǒng)內(nèi)毒素檢測(cè)（如鱟試劑法）的覆蓋空白。...

熱原檢測(cè)MAT法的法規(guī)地位持續(xù)提升，已成為多國藥典認(rèn)可的熱原檢測(cè)替代方法。歐洲藥典（EP）是推動(dòng) MAT 應(yīng)用的關(guān)鍵力量：通則 2.6.30 明確 MAT 可替代家兔熱原試驗(yàn)（RPT），且能同時(shí)檢測(cè)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩?024 年歐洲藥典委員會(huì)批準(zhǔn)刪除所有條款中的家兔法，修訂文本將于 2025 年7月1日生效，強(qiáng)制鼓勵(lì)使用 MAT 等體外替代方法。美國藥典（USP）<151> 規(guī)定，經(jīng)驗(yàn)證的體外熱原試驗(yàn)（如 MAT）可替代家兔法，且需依據(jù) USP<1225>開展驗(yàn)證；FDA 行業(yè)指南進(jìn)一步明確 MAT 的合規(guī)性。中國藥典 2020 年版通則 9301 將 MAT 列為熱原檢查的補(bǔ)充方法，...

MAT法（單核細(xì)胞活化反應(yīng)測(cè)定）熱原檢測(cè)基于人體免疫反應(yīng)機(jī)制設(shè)計(jì)，原理是：內(nèi)毒素（革蘭氏陰性菌來源）與非內(nèi)毒素?zé)嵩ǜ锾m氏陽性菌、霉菌、病毒等來源）進(jìn)入人體后，會(huì)活化單核細(xì)胞或單核細(xì)胞系，使其釋放 IL-6、IL-1、IL-1β、TNF-α 等促炎細(xì)胞因子。檢測(cè)時(shí)將供試品與單核細(xì)胞 / 單核細(xì)胞系共孵育，再通過 ELISA 定量檢測(cè)釋放的 IL-6 含量，結(jié)合內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)曲，即可判斷供試品中熱原含量是否符合規(guī)定，實(shí)現(xiàn)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩娜采w檢測(cè)。 PyroSHENTEK 熱原檢測(cè)（MAT）試劑盒的單核細(xì)胞系無需供體，避免PBMC血源供應(yīng)受限及標(biāo)志物檢測(cè)環(huán)節(jié)。陜西化學(xué)制藥熱原檢測(cè)...

湖州申科生物熱原檢測(cè)（MAT法） 試劑盒在靈敏度、穩(wěn)定性與適用性上表現(xiàn)突出，關(guān)鍵性能參數(shù)符合藥典要求：標(biāo)曲線性范圍 0.0125-1.0EU/mL，相關(guān)系數(shù) R2≥0.98，定量限 0.025EU/mL，檢測(cè)限（LOD）0.0125EU/mL，批間精密度 CV≤25%，可準(zhǔn)確捕捉微量熱原。其優(yōu)勢(shì)在于特定的單核細(xì)胞系 —— 與依賴供體血液的 PBMC 細(xì)胞不同，申科 MAT 細(xì)胞系來源清晰可溯源，無需倫理審批與血站合作，規(guī)避供體差異導(dǎo)致的檢測(cè)波動(dòng)。對(duì)比同類型產(chǎn)品（如國外廠家 PBMC 細(xì)胞），申科細(xì)胞系的標(biāo)曲各濃度點(diǎn) CV 更低（ 低至3.6%）、相對(duì)偏差更?。?12.31%），線性 R2 ...

單核細(xì)胞系憑借標(biāo)準(zhǔn)化、可控性等優(yōu)勢(shì)，有效解決PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）在熱原檢測(cè)中的局限。其一，單核細(xì)胞系源自永生化細(xì)胞株（如 Mono-Mac-6），經(jīng)篩選后細(xì)胞特性高度均一，消除供體差異，讓熱原檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性大幅提升。其二，其培養(yǎng)過程可控，培養(yǎng)基配方與環(huán)境（溫度、CO?濃度）可準(zhǔn)確調(diào)控，能維持細(xì)胞好的活性，避免 PBMC 因分選、凍存導(dǎo)致的活性衰減。其三，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境波動(dòng)耐受性更強(qiáng)，可保障細(xì)胞遺傳穩(wěn)定且無污染物風(fēng)險(xiǎn)，降低熱原檢測(cè)的操作復(fù)雜度與誤差率。 熱原檢測(cè)MAT零動(dòng)物消耗，降低檢測(cè)成本，提升檢測(cè)效率和倫理水平。上海血液制品熱原檢測(cè)結(jié)果判定 PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）的供體差異會(huì)...

單核細(xì)胞系憑借標(biāo)準(zhǔn)化、可控性等優(yōu)勢(shì)，有效解決PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）在熱原檢測(cè)中的局限。其一，單核細(xì)胞系源自永生化細(xì)胞株（如 Mono-Mac-6），經(jīng)篩選后細(xì)胞特性高度均一，消除供體差異，讓熱原檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性大幅提升。其二，其培養(yǎng)過程可控，培養(yǎng)基配方與環(huán)境（溫度、CO?濃度）可準(zhǔn)確調(diào)控，能維持細(xì)胞好的活性，避免 PBMC 因分選、凍存導(dǎo)致的活性衰減。其三，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境波動(dòng)耐受性更強(qiáng)，可保障細(xì)胞遺傳穩(wěn)定且無污染物風(fēng)險(xiǎn)，降低熱原檢測(cè)的操作復(fù)雜度與誤差率。 PyroSHENTEK熱原檢測(cè)試劑盒采用“單核細(xì)胞+ELISA”標(biāo)準(zhǔn)化體系，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。高效熱原檢測(cè)MAT法 M...

PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）的供體差異會(huì)直接導(dǎo)致熱原檢測(cè)結(jié)果的波動(dòng)，主要體現(xiàn)在 IL-6 釋放水平的不一致。不同供體的 PBMC，其單核細(xì)胞比例、TLR 受體表達(dá)量、免疫活性狀態(tài)存在差異：有的供體 PBMC 受熱原刺激后， IL-6 釋放量高；有的則極低，甚至無明顯響應(yīng)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示， PBMC 的標(biāo)曲各濃度點(diǎn)相對(duì)偏差有高達(dá) 171.43%的，正是這種差異的體現(xiàn)，導(dǎo)致熱原檢測(cè)結(jié)果難以標(biāo)準(zhǔn)化，無法準(zhǔn)確判斷供試品熱原是否超標(biāo)，從而增加了藥品的質(zhì)量控制風(fēng)險(xiǎn)。 歐洲藥典通則 2.6.30 明確 MAT 可替代家兔法熱原檢查，能同時(shí)檢測(cè)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩?。江西合?guī)性熱原檢測(cè) MAT 試劑盒配套的...

MAT法熱原檢測(cè)中，非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EP）對(duì)照品設(shè)為 “選做”，且試劑盒不默認(rèn)配備，需結(jié)合檢測(cè)需求靈活使用，背后有明確的設(shè)置邏輯。首先，試劑盒開發(fā)階段已通過驗(yàn)證（用多種 NEP 配體刺激細(xì)胞），證明其可檢出 NEP，后期實(shí)驗(yàn)是否加入 NEP 對(duì)照，只需根據(jù)內(nèi)部管理要求或?qū)I(yè)人員建議確定，無需強(qiáng)制設(shè)置；若產(chǎn)品產(chǎn)線明確無 NEP 污染風(fēng)險(xiǎn)（如只使用革蘭氏陰性菌原料），可刪除 NEP 對(duì)照，簡化操作。其次，試劑盒不配備 NEP 對(duì)照品，是因不同用戶需求差異大 —— 部分用戶需檢測(cè)特定 NEP（如脂磷壁酸），部分需檢測(cè)廣譜 NEP，因此提供單獨(dú)購買選項(xiàng)，用戶可按需選擇，避免資源浪費(fèi)。NEP 對(duì)照品...

中國藥典與歐洲藥典對(duì) MAT 熱原檢測(cè)的細(xì)胞類型及復(fù)孔數(shù)有明確要求，且存在細(xì)節(jié)差異。細(xì)胞類型上，兩者均認(rèn)可人全血、PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞，至少 4 個(gè)供體，歐洲藥典建議 8 個(gè)供體），中國藥典明確將單核細(xì)胞系納入，歐洲藥典則要求單核細(xì)胞系需做支原體污染檢測(cè)、細(xì)胞鑒別等；檢測(cè)方法均為 “熱原刺激細(xì)胞 + ELISA 檢測(cè) IL-6/IL-1β/TNF-α”。復(fù)孔數(shù)方面，兩者均規(guī)定平行孔≥4、濃度點(diǎn)≥4，中國藥典額外要求標(biāo)曲 r≥0.90，主要目的是通過多重復(fù)孔抵消 PBMC 的不穩(wěn)定性，確保熱原檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 湖州申科 MAT法熱原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞復(fù)融后可直接使用，無需離心復(fù)蘇，24 ...

MAT 法熱原檢測(cè)標(biāo)曲采用非倍比稀釋，而非 1-0.5-0.25 的倍比稀釋，主要優(yōu)勢(shì)在于提升標(biāo)曲準(zhǔn)確性與適用性，避免稀釋誤差影響。一是可密集覆蓋關(guān)鍵濃度區(qū)間：熱原檢測(cè)的重點(diǎn)關(guān)注區(qū)為低濃度拐點(diǎn)（如 0.0125-0.1EU/mL）與高濃度平臺(tái)區(qū)（如 0.5-1EU/mL），非倍比稀釋可在這些區(qū)間設(shè)置更多濃度點(diǎn)（如 0.0125、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1EU/mL），提升曲線擬合精度，而倍比稀釋低濃度點(diǎn)少，易導(dǎo)致低濃度熱原定量不準(zhǔn)。二是降低稀釋誤差累積：倍比稀釋需連續(xù)稀釋（如 1EU/mL→0.5EU/mL→0.25EU/mL），每一步誤差會(huì)累積，導(dǎo)致低濃度點(diǎn)實(shí)際濃...

一次合格的 MAT 法熱原檢測(cè)，需同時(shí)滿足 “合格標(biāo)曲” 與 “合格樣品檢測(cè)值及回收率” 兩大關(guān)鍵條件。合格標(biāo)曲需具備四要素：一是良好線性，采用 4-Parameter Logistic 擬合，R2 需接近 1.0，避免線性不佳導(dǎo)致定量偏差；二是良好信號(hào)值，各濃度點(diǎn) OD 值需呈梯度變化，高濃度點(diǎn) OD 值需足夠（如上限濃度 OD600 達(dá) 1.0 左右），信號(hào)過低會(huì)影響靈敏度；三是良好 CV，復(fù)孔間 CV 需控制在合理范圍（定量限內(nèi)≤25%、定量上下限≤30%），確保重復(fù)性；四是良好背景值，陰性對(duì)照 OD 值需低于標(biāo)曲下限濃度點(diǎn) 10%，排除外源污染。合格樣品檢測(cè)值則需滿足加標(biāo)回收率在 ...

MAT 法熱原檢測(cè)中，細(xì)胞傳代的代次控制是保障檢測(cè)穩(wěn)定性的關(guān)鍵，需結(jié)合細(xì)胞特性與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)制定標(biāo)準(zhǔn)。參考行業(yè)文獻(xiàn)，單核細(xì)胞系（如 HL-60、THP1）的使用代次通常不超過 20 代，代次過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生物學(xué)特性改變：一是 TLR 受體表達(dá)下降，如 TLR4 表達(dá)量在 20 代后下降 40%，導(dǎo)致內(nèi)毒素檢測(cè)靈敏度降低；二是細(xì)胞倍增時(shí)間延長，從 24 小時(shí)延長至 36 小時(shí)，影響共培養(yǎng)時(shí)長的準(zhǔn)確性；三是炎癥因子分泌減少，IL-6 分泌量在 20 代后下降 35%，導(dǎo)致熱原濃度低估。申科對(duì)配套的 HL-60 細(xì)胞系進(jìn)行代次穩(wěn)定性驗(yàn)證，結(jié)果顯示：1-15 代細(xì)胞的熱原響應(yīng)性一致（加標(biāo)回收率 85%...

MAT法熱原檢測(cè)特定標(biāo)準(zhǔn)品與傳統(tǒng)細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品存在本質(zhì)差異，需明確區(qū)分以保障檢測(cè)準(zhǔn)確性。MAT 特定標(biāo)準(zhǔn)品為大腸桿菌（E.coli 0113:H10:K）菌株制備，經(jīng)全國 5 家藥品檢驗(yàn)所（含中檢院）用凝膠法、動(dòng)態(tài)濁度法及動(dòng)態(tài)顯色法協(xié)作標(biāo)定，溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)品，可同時(shí)檢測(cè)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩?；而傳統(tǒng)細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品（如 9000EU 規(guī)格）源自大腸桿菌（E.coli O111:B4），只適用于內(nèi)毒素檢測(cè)，無法識(shí)別非內(nèi)毒素?zé)嵩?。關(guān)鍵驗(yàn)證數(shù)據(jù)顯示，用 MAT法檢測(cè) 9000EU 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，加標(biāo)回收率不在 50%-200% 的合格范圍，因此不能替代 MAT 特定標(biāo)準(zhǔn)品。值得注意的是...

隨著發(fā)熱反應(yīng)分子機(jī)制研究的不斷深化，單核細(xì)胞活化試驗(yàn)（MAT）作為一種體外熱原檢測(cè)技術(shù)，愈發(fā)受到醫(yī)藥與醫(yī)療器械行業(yè)的關(guān)注并逐步推廣應(yīng)用。該方法的原理是：讓人體全血與待檢樣品中的熱原充分接觸后，通過檢測(cè)體系中產(chǎn)生的 IL-1β、IL-6（因穩(wěn)定性強(qiáng)、重復(fù)性優(yōu)，常作為關(guān)鍵檢測(cè)指標(biāo)）、TNF 等促炎細(xì)胞因子含量，實(shí)現(xiàn)對(duì)熱原污染程度的評(píng)估，整個(gè)過程能高度模擬人體先天免疫系統(tǒng)對(duì)熱原的應(yīng)答反應(yīng)。相較于傳統(tǒng)熱原檢測(cè)手段，MAT 的優(yōu)勢(shì)更為突出：不僅可檢出各類熱原污染物，包括尚未明確性質(zhì)的未知熱原，以及革蘭氏陽性菌（脂磷壁酸）、真菌、病毒等產(chǎn)生的非內(nèi)毒素?zé)嵩?，填補(bǔ)了傳統(tǒng)內(nèi)毒素檢測(cè)（如鱟試劑法）的覆蓋空白。...

革蘭氏陽性菌注射劑產(chǎn)品只依賴內(nèi)毒素檢測(cè)存在安全風(fēng)險(xiǎn)，需結(jié)合熱原檢測(cè)特性制定防控方案。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖成分，而革蘭氏陽性菌可產(chǎn)生非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EPs），如脂磷壁酸，這類物質(zhì)同樣能引發(fā)人體發(fā)熱反應(yīng)，若只檢測(cè)內(nèi)毒素，可能遺漏 NEPs 污染，導(dǎo)致臨床用藥風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)此，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需重點(diǎn)關(guān)注三點(diǎn)：一是建議開展家兔法與內(nèi)毒素檢測(cè)的一致性實(shí)驗(yàn)，對(duì)比兩種方法的檢測(cè)結(jié)果，排查是否存在內(nèi)毒素未檢出但家兔法陽性的情況；二是采用 MAT 法熱原檢測(cè)，其通過單核細(xì)胞活化機(jī)制，可同時(shí)識(shí)別內(nèi)毒素與 NEPs，若 MAT 法檢測(cè)陽性，需進(jìn)一步追溯 NEPs 來源；三是若無法排除 NEPs 風(fēng)險(xiǎn)，必須按藥典...

革蘭氏陽性菌注射劑產(chǎn)品只依賴內(nèi)毒素檢測(cè)存在安全風(fēng)險(xiǎn)，需結(jié)合熱原檢測(cè)特性制定防控方案。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖成分，而革蘭氏陽性菌可產(chǎn)生非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EPs），如脂磷壁酸，這類物質(zhì)同樣能引發(fā)人體發(fā)熱反應(yīng)，若只檢測(cè)內(nèi)毒素，可能遺漏 NEPs 污染，導(dǎo)致臨床用藥風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)此，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需重點(diǎn)關(guān)注三點(diǎn)：一是建議開展家兔法與內(nèi)毒素檢測(cè)的一致性實(shí)驗(yàn)，對(duì)比兩種方法的檢測(cè)結(jié)果，排查是否存在內(nèi)毒素未檢出但家兔法陽性的情況；二是采用 MAT 法熱原檢測(cè)，其通過單核細(xì)胞活化機(jī)制，可同時(shí)識(shí)別內(nèi)毒素與 NEPs，若 MAT 法檢測(cè)陽性，需進(jìn)一步追溯 NEPs 來源；三是若無法排除 NEPs 風(fēng)險(xiǎn)，必須按藥典...

熱原檢測(cè)MAT法的法規(guī)地位持續(xù)提升，已成為多國藥典認(rèn)可的熱原檢測(cè)替代方法。歐洲藥典（EP）是推動(dòng) MAT 應(yīng)用的關(guān)鍵力量：通則 2.6.30 明確 MAT 可替代家兔熱原試驗(yàn)（RPT），且能同時(shí)檢測(cè)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩?024 年歐洲藥典委員會(huì)批準(zhǔn)刪除所有條款中的家兔法，修訂文本將于 2025 年7月1日生效，強(qiáng)制鼓勵(lì)使用 MAT 等體外替代方法。美國藥典（USP）<151> 規(guī)定，經(jīng)驗(yàn)證的體外熱原試驗(yàn)（如 MAT）可替代家兔法，且需依據(jù) USP<1225>開展驗(yàn)證；FDA 行業(yè)指南進(jìn)一步明確 MAT 的合規(guī)性。中國藥典 2020 年版通則 9301 將 MAT 列為熱原檢查的補(bǔ)充方法，...